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[求助] 請(qǐng)問HPLC不使用色譜柱能出峰嗎？

這個(gè)問題比較詭異。實(shí)驗(yàn)室新買了HPLC，軟件什么的不是很穩(wěn)定，怕把柱子用壞了。沒裝柱子跑了甲苯（265檢測(cè)）和羅丹明B（550檢測(cè)），流動(dòng)相是甲醇和水，采集的數(shù)據(jù)各種各樣，有時(shí)候有峰，有時(shí)候是斜向上的直線，有時(shí)候就是基線。這是因?yàn)闆]有裝柱子的問題嗎？

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1樓 2012-10-31 08:28:14

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proxyz

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★
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沒柱子也可以出峰的
你連接對(duì)了沒？或者檢測(cè)器沒開？

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2樓2012-10-31 08:32:45

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不安裝色譜柱也出峰。

是不是新儀器管路沒沖好的原因。把流動(dòng)相中甲醇比例增大，多穩(wěn)定一段時(shí)間再試試

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3樓2012-10-31 08:33:19

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引用回帖:

3樓: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 08:33:19
不安裝色譜柱也出峰。

是不是新儀器管路沒沖好的原因。把流動(dòng)相中甲醇比例增大，多穩(wěn)定一段時(shí)間再試試

大約要穩(wěn)定多久呢？之前工程師來過，用他的柱子和樣品跑的結(jié)果挺好的。后來實(shí)驗(yàn)室沒人用就閑置了一段時(shí)間。沒裝柱子會(huì)很快出峰嗎？我在建立methods的時(shí)候它默認(rèn)有一段時(shí)間的pre-run，最少0.5 min，數(shù)據(jù)是從0.5min之后開始采集的，我用1ml/min的流速，不會(huì)錯(cuò)過出峰了吧？

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4樓2012-10-31 08:42:59

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引用回帖:

4樓: Originally posted by futurememory at 2012-10-31 08:42:59
大約要穩(wěn)定多久呢？之前工程師來過，用他的柱子和樣品跑的結(jié)果挺好的。后來實(shí)驗(yàn)室沒人用就閑置了一段時(shí)間。沒裝柱子會(huì)很快出峰嗎？我在建立methods的時(shí)候它默認(rèn)有一段時(shí)間的pre-run，最少0.5 min，數(shù)據(jù)是從0.5min ...

首先確認(rèn)管路是干凈的，可以用80%甲醇沖一兩個(gè)小時(shí)

多長(zhǎng)時(shí)間出峰跟你儀器的死體積有關(guān)系，有的是半分鐘，有的能一分鐘多，不好說的，所以建議你去掉pre-run，從進(jìn)樣就開始采集

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5樓2012-10-31 08:54:41

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5樓: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 08:54:41
首先確認(rèn)管路是干凈的，可以用80%甲醇沖一兩個(gè)小時(shí)

多長(zhǎng)時(shí)間出峰跟你儀器的死體積有關(guān)系，有的是半分鐘，有的能一分鐘多，不好說的，所以建議你去掉pre-run，從進(jìn)樣就開始采集...

設(shè)置pump參數(shù)的時(shí)候，step0 必須至少0.5，我再研究研究說明書看。是Perkin elmer的Flexar HPLC，不知道有沒有人用過？總覺得以前沒聽說過。

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6樓2012-10-31 09:03:49

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引用回帖:

6樓: Originally posted by futurememory at 2012-10-31 09:03:49
設(shè)置pump參數(shù)的時(shí)候，step0 必須至少0.5，我再研究研究說明書看。是Perkin elmer的Flexar HPLC，不知道有沒有人用過？總覺得以前沒聽說過。...

每個(gè)液相都應(yīng)該可以從進(jìn)樣就可以采集的

樓主說的0.5是不是泵的梯度時(shí)間？

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7樓2012-10-31 09:14:00

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可以出峰，只要經(jīng)過檢測(cè)器檢測(cè)到就會(huì)出峰，柱子只是起到分離的作用，建議用甲醇多沖下系統(tǒng)試試，時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)

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8樓2012-10-31 10:37:01

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我也碰到這種不出峰的事情了，不接柱子，什么都沒有，就是一根斜向上的線，你解決可了嗎？

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9樓2012-10-31 14:27:08

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引用回帖:

7樓: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 09:14:00
每個(gè)液相都應(yīng)該可以從進(jìn)樣就可以采集的

樓主說的0.5是不是泵的梯度時(shí)間？...

就是類似下圖的界面。我不用跑梯度，就設(shè)了step1，沒有設(shè)step2，系統(tǒng)就默認(rèn)step0那里time必須0.5，而detector的時(shí)間是從step1開始的。

1.jpg

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10樓2012-10-31 14:53:28

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