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組織分布樣品制備方法
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最近在做五種成分在大鼠腎組織分布實驗,樣品制備方法為:將大鼠腎稱重,加4倍10%氨水-生理鹽水,剪碎勻漿,取組織勻漿液400ul,加500ng/ml混標(biāo)和內(nèi)標(biāo)各50ul,加2倍量甲醇(1ml),渦旋10min,離心(13000rpm,10min,4℃)后取上清液1ml,加10%氨水-生理鹽水1ml,加3ml乙酸乙酯,渦旋10分鐘后離心(3000rpm,10min,4℃),取上清液50℃氮氣吹干,加500ul10%乙腈復(fù)溶,13000rpm,4℃離心15min,取上清液進(jìn)樣。 問題:樣品復(fù)溶離心后溶液上層有混懸液體,曾試過用0.22um濾膜過濾進(jìn)樣但過濾后兩種成分檢測不出。也試過只取中間澄清層進(jìn)樣,但柱子前端篩板堵了,求各位高手相助解決下樣品制備方法啊! |
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