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zhangyonghu木蟲 (小有名氣)
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[求助]
AFLP的欲擴(kuò)范圍大
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我最近做AFLP，DNA里含點(diǎn)蛋白質(zhì)，用PSTI和MSEI雙酶切，可是欲擴(kuò)以后在750那有一條亮帶，彌散的范圍也偏大，是怎么回事 是不是蛋白質(zhì)對酶切存在影響，怎么能把蛋白質(zhì)除掉呢 這是我的欲擴(kuò)的圖 未命名.jpg |
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CXL19880406
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+4, 鼓勵應(yīng)助 2012-11-26 18:52:25
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+4, 鼓勵應(yīng)助 2012-11-26 18:52:25
| 首先，DNA里含蛋白是測的OD值發(fā)現(xiàn)的么？如果是用CTAB法的話有可能是酚沒除凈，但是如果做AFLP的話DNA的純度是可以適當(dāng)放低的，畢竟之后你要設(shè)計引物，PCR只按你的引物來擴(kuò)增，蛋白影響不大的；其次，不知道你做的是什么DNA，我做的水稻預(yù)擴(kuò)彌散一片，完全是沒有條帶的，但是做了選擴(kuò)以后，條帶就特別清晰很漂亮，我的老師告訴我在預(yù)擴(kuò)過程中沒有條帶都是正常的，正常操作來講是不需要跑膠的，建議你可以接著往下做選擴(kuò)試試。祝好運(yùn)～ |
7樓2012-11-26 11:10:31
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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2樓2012-11-26 06:42:21
shucanwei
木蟲 (正式寫手)
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3樓2012-11-26 07:25:36
shucanwei
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4樓2012-11-26 07:26:40
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