 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1805 | 回復(fù): 1 | ||
wlf200501
|
[求助]
目的基因內(nèi)部含有與表達(dá)載體相同的酶切位點(diǎn)
|
|
如圖，我要把我的目的片段連接到這個(gè)表達(dá)載體內(nèi)部，但是這個(gè)載體在構(gòu)建的時(shí)候目標(biāo)基因兩端只有NcolⅠ和HindⅢ這兩個(gè)酶切位點(diǎn)，可是我的目的基因內(nèi)有HindⅢ酶切位點(diǎn)，目前我的目的片段已經(jīng)連接到克隆載體上面了（只是簡(jiǎn)單連接到pEASY-T1 simple cloning kit，目的基因兩端還未加任何酶切位點(diǎn)）這就有個(gè)問(wèn)題了，用酶切從克隆載體上面切我的目的片段的時(shí)候會(huì)把我的基因也給切斷啊，這該怎么辦呢？大俠支支招啊。 表達(dá)載體圖.png |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有89人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 構(gòu)建了個(gè)基因的表達(dá)載體，發(fā)現(xiàn)有一個(gè)氨基酸發(fā)生突變
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 構(gòu)建pBI121表達(dá)載體，目的基因與載體連接不上
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 有誰(shuí)知道關(guān)于Pfrt I 質(zhì)粒的信息，包括他的基因序列和含有的酶切位點(diǎn)。急啊
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因連接表達(dá)載體后涂板不長(zhǎng)菌
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】在構(gòu)建基因表達(dá)載體的時(shí)候什么時(shí)候需要人為地在上面加上啟動(dòng)子？
已經(jīng)有6人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-11-28 13:53:13
wlf200501: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝幫助，目前我能想到的也是第二個(gè)方案了 2012-11-28 14:13:39
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-11-28 13:53:13
wlf200501: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝幫助，目前我能想到的也是第二個(gè)方案了 2012-11-28 14:13:39
|
有兩種方法可供選擇: 1.可以買一種In-fusion的試劑盒,目的片斷不需要酶切,直接進(jìn)行克隆，具體的操作方法可以看一下他們的說(shuō)明. 2.將載體上的 HindIII---phaT---KpnI這部分序列擴(kuò)增下來(lái)，加到你的目的序列上，然后用NcoI和KpnI進(jìn)行酶切克隆。 |
2樓2012-11-28 11:01:45
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 wlf200501 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +7 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 好好讀書。 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277跪求調(diào)劑 +5 | 1915668 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 壓國(guó)家一區(qū)線，求導(dǎo)師收留，有恩必謝！ +4 | 迷人的哈哈 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +8 | 曼111 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +6 | HanBeiNingZC 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 零八# 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +9 | 上岸吧ZJY 2026-03-22 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 294分080500材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +4 | 柳溪邊 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調(diào)劑 +9 | Mr. Z 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | plum李子 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] B區(qū)考研調(diào)劑 +4 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 13853210211 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二 +5 | leaflight 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大化學(xué)322求調(diào)劑 +4 | 17501029541 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-21 | 3/150 |
|