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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 分步雙酶切
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混水小蟲金蟲 (小有名氣)
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[求助]
分步雙酶切
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對質(zhì)粒進行Hind III 和Sal I雙酶切，因兩個酶切位點離的太近（中間10個bp），請問是否應該采用分步酶切��？ 還有就是如果采用雙酶切，這兩個酶的酶切順序如何確定��？ 在第一次酶切后，是不是必須要進行去磷酸化處理？看到之前的帖子上，說關(guān)于分步酶切中間的純化步驟中，很多同學都沒有說去磷酸化處理這個環(huán)節(jié)，是不是這一環(huán)節(jié)可以省略��？ 純化方法哪個較好些��？有些同學說是要電泳再割膠回收，有的說不電泳直接乙醇沉淀法回收，也有的人說不電泳直接加入溶膠buffer，開始回收！ 請熟知這一方面的大蝦給點幫助吧！ |
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ben1147
木蟲 (正式寫手)
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3樓2012-11-29 22:35:54
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gyesang
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4樓2012-11-29 22:41:57
cicelyzh
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5樓2012-11-30 06:52:59
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