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混水小蟲金蟲 (小有名氣)
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[求助]
分步雙酶切
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對質(zhì)粒進(jìn)行Hind III 和Sal I雙酶切，因兩個酶切位點(diǎn)離的太近（中間10個bp），請問是否應(yīng)該采用分步酶切��？ 還有就是如果采用雙酶切，這兩個酶的酶切順序如何確定��？ 在第一次酶切后，是不是必須要進(jìn)行去磷酸化處理？看到之前的帖子上，說關(guān)于分步酶切中間的純化步驟中，很多同學(xué)都沒有說去磷酸化處理這個環(huán)節(jié)，是不是這一環(huán)節(jié)可以省略�。� 純化方法哪個較好些��？有些同學(xué)說是要電泳再割膠回收，有的說不電泳直接乙醇沉淀法回收，也有的人說不電泳直接加入溶膠buffer，開始回收！ 請熟知這一方面的大蝦給點(diǎn)幫助吧！ |
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gyesang
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4樓2012-11-29 22:41:57
2樓2012-11-29 21:58:32
ben1147
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3樓2012-11-29 22:35:54
cicelyzh
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5樓2012-11-30 06:52:59
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