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[交流]
細菌總DNA提取條帶詭異
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（1）我的是梭菌，G+ （2）omega試劑盒提取，帶玻璃粉的那種 （3）基因組大小4M，還有一個200kb的mega質(zhì)粒 160V跑15min見下圖： 野生菌 2012-11-30 15 小時 40 分鐘.jpg 我的問題： （1）我看別人提的總DNA都特別淡，為什么我的這么亮？ （2）聽說在總DNA提取過程中DNA會斷了成幾十KB的片段，在瓊脂糖上跑膠分不開，也只有一條帶，可我的為什么兩條帶？ （3）如果有一條是質(zhì)粒，上面的是質(zhì)粒吧？， （4）大家的總DNA提取圖中在下部都有彌散的RNA條帶，我的怎么這么干凈？ （5）點的兩個孔是同一個樣，為什么右邊那個還有好多在空里面不跑出來？ [ Last edited by 看天 on 2012-11-30 at 19:02 ] |
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看天: 金幣+10, 謝謝 2012-12-01 14:29:43
看天: 金幣+10, 謝謝 2012-12-01 14:29:43
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1. 提總DNA也不一定很淡，看你上樣量是多少了。不知道你點了多少，感覺至少有10ug。 2. 兩條帶大概是因為你的菌里有質(zhì)粒吧。提出的染色體DNA一般會shear成幾十K，質(zhì)粒的結構相對來說更穩(wěn)定，如果操作溫柔的話應該是完整的。 3. 這個不是很確定，我個人也認為上面的是質(zhì)粒。 4. 你用的盒子里面是否有消化RNA。還有，如果樣品在-20度放置很久后RNA自己就慢慢降解了。 5. 跑不下來是因為有蛋白污染，形成DNA蛋白復合物。可能是樣品沒有溶解很均勻，大概你加右邊的樣的時候吸的蛋白多一些。 |
2樓2012-12-01 08:50:50
4樓2012-12-01 15:46:28
5樓2012-12-26 12:46:59
7樓2012-12-26 20:45:24
8樓2012-12-27 08:13:12
簡單回復
su-b083樓
2012-12-01 12:49
~
su-b086樓
2012-12-26 17:50
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