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苦茶暖心銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
免疫組化中的問題
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| 大家好,想問下做小鼠腦的冰凍切片時,甲醛固定后蔗糖梯度脫水時,配制蔗糖時感覺30%的蔗糖配制后溶液有點溫,可能是蔗糖溶解時放熱,想問下用不用把蔗糖溶液放到四度冰箱降溫再用,如果直接用的話,會不會增加免疫組化的非特異性染色? |

銅蟲 (初入文壇)
| 從我們做的經(jīng)驗來看,不必進行上述處理。冰凍切片后,晾干,然后用丙酮固定10-15min即可。如果沒有時間直接做下去,還可以用塑料袋包好切片盒,置于4度冰箱內(nèi),在這樣的溫度與環(huán)境下,抗原不會消失。在做免疫組化時,取出,不必進行枸椽酸緩沖液高溫抗原修改復;有時也不必進行tritonX-100進行細胞打孔,做免疫組化后沒有出現(xiàn)非特異性染色。 |

金蟲 (正式寫手)
銀蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
銀蟲 (小有名氣)
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