 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2485 | 回復(fù): 25 | ||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | ||
[求助]
有關(guān)蛋白表達的問題
|
||
| 我的目的基因片段只有200bp左右，現(xiàn)在連接到Pcdf-dute和pet-32a，每個都轉(zhuǎn)到BL-21和Rosste中，誘導過后，sds-page檢測，可是卻不表達，誘導條件試過37度、25度、20度、18度和16度，IPTG濃度0.8mm、1mm和1.2mm，培養(yǎng)基試過LB、TB還有一個高濃度培養(yǎng)基，都沒有表達，現(xiàn)在郁悶死了，無計可施了，各位大俠幫幫忙。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有80人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 目的蛋白表達的問題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 關(guān)于蛋白表達的問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 膜蛋白表達問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 問一下蛋白表達中出現(xiàn)的問題~
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 做蛋白體外表達時的引物設(shè)計問題！
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 關(guān)于蛋白重組表達的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】酵母表達可溶性蛋白問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白酶表達問題，求蛋白表達系統(tǒng)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于綠色熒光蛋白表達問題
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】急！急！急！ his標簽表達的蛋白出問題了，求指導！�。�
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】基因工程菌誘導蛋白表達的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于大腸桿菌中蛋白表達的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zibeisha(金幣+3): 2011-11-21 08:41:06
wanhscn(金幣+5): 熱心的認真的回答！ 2011-11-21 09:01:35
西瓜(金幣+2, MolEPI+1): Good！ 2011-11-22 18:09:41
zibeisha(金幣+3): 2011-11-21 08:41:06
wanhscn(金幣+5): 熱心的認真的回答！ 2011-11-21 09:01:35
西瓜(金幣+2, MolEPI+1): Good！ 2011-11-22 18:09:41
| 蛋白原核表達本來就是個難題 你在這就寥寥幾句 誰也幫不上忙 回話的都是只懂一二的 蛋白原核表達 單從表不表達上來說 主要要注意 蛋白的性質(zhì) 這個是最主要的 有的蛋白是疏水性極強的 有的蛋白是毒性的 有的蛋白等等 如果相關(guān)載體 菌株 都試過了 那只能放棄這個系統(tǒng)了 溫度 誘導濃度什么的 那只是針對表達質(zhì)量而言 你現(xiàn)在都沒表達出來 所以先確定到底有沒有表達 確定載體構(gòu)建是否百分百正確 然后確定蛋白真的是沒表達 還是你沒檢測到 因為從KB數(shù)上看 你的蛋白很小 所以注意系統(tǒng) 可以用western檢測一下 如果有表達 只是量小 那么好 再繼續(xù)這個問題 |
5樓2011-11-21 02:42:51
靜雨飛雪
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 195.8
- 帖子: 3
- 在線: 13.3小時
- 蟲號: 1263668
- 注冊: 2011-04-12
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學
22樓2011-12-04 10:00:13
2樓2011-11-20 21:16:06
blackrose8089
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 16
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 貴賓: 0.11
- 金幣: 10638.6
- 散金: 155
- 紅花: 30
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 3702
- 在線: 790.1小時
- 蟲號: 614948
- 注冊: 2008-09-28
- 專業(yè): 植物學研究的新技術(shù)、新方
3樓2011-11-20 21:32:12
llglo
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.7
- 帖子: 15
- 在線: 13.3小時
- 蟲號: 254931
- 注冊: 2006-05-27
- 性別: MM
- 專業(yè): 免疫生物學
4樓2011-11-20 23:12:00
6樓2011-11-21 08:38:28
xiaoshidemei
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3036.1
- 紅花: 1
- 帖子: 334
- 在線: 73.3小時
- 蟲號: 1400353
- 注冊: 2011-09-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學
7樓2011-11-21 09:58:37
gjs713
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 168 (高中生)
- 金幣: 16616.5
- 散金: 138
- 紅花: 16
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 3951
- 在線: 1045.4小時
- 蟲號: 608364
- 注冊: 2008-09-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
8樓2011-11-21 10:22:11
冰泉cathy
木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1457.3
- 散金: 20
- 帖子: 198
- 在線: 106.2小時
- 蟲號: 1394210
- 注冊: 2011-09-07
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
9樓2011-11-21 12:48:10
【答案】應(yīng)助回帖
★
西瓜(金幣+1): 辛苦 2011-11-22 18:10:20
西瓜(金幣+1): 辛苦 2011-11-22 18:10:20
|
好吧 得早說嘛 膜蛋白 膜蛋白表達 呵呵 看運氣了 不能說太多了 http://wolfson.huji.ac.il/wolfson.html 上這學習一下 實在不行就只能另換系統(tǒng)了 酵母的 體外的 等等 |
10樓2011-11-21 15:17:58
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zibeisha 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +6 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 260求調(diào)劑 +3 | 朱芷琳 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +6 | 金恩貝 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +3 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 要好好無聊 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +5 | 紙魚ly 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601調(diào)劑 358分 +3 | zzzzggh 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | ydfyh 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料 336 求調(diào)劑 +3 | An@. 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學，327分，材料與化工085600 +9 | Ncdx123456 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +8 | 小材化本科 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學 ，070300化學學碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學碩297已過四六級求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|