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關(guān)于蛋白表達(dá)的問題
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| 我的目的片段1600多bp 重組質(zhì)粒也正確 通用引物和交叉PCR均驗(yàn)證過 沒問題 測序結(jié)果也正確 就是不出蛋白電泳帶 請(qǐng)問為什么 IPTG 0.1 0.5 都用過了 溫度從15到37都試過了 都不出條帶 不知道為什么 請(qǐng)哪位大俠級(jí)人物賜教 |
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蚊在江湖
銀蟲 (小有名氣)
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2樓2011-11-01 14:56:36
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wanhscn(金幣+1): 鼓勵(lì)多去應(yīng)助回帖,有獎(jiǎng)勵(lì)! 2011-11-02 11:57:47
wanhscn(金幣+1): 鼓勵(lì)多去應(yīng)助回帖,有獎(jiǎng)勵(lì)! 2011-11-02 11:57:47
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首先感謝您賜予的寶貴意見 是這樣 我也考慮到了稀有密碼子的事了 通過評(píng)測的確有一個(gè)位置發(fā)生了串聯(lián)，其它的都是分散出現(xiàn)的 是兩個(gè)密碼子緊挨著。載體換過了分別是PET-30a和PGEX6P-2都不行 至于宿主菌我用的BL-21 我們沒有別的了 文獻(xiàn)上說是包涵體表達(dá) 請(qǐng)問哪位高人有ROSSETA菌 可以給我點(diǎn)嗎 或者交換 謝謝了 |
3樓2011-11-02 00:50:48
liufeifeia
銅蟲 (初入文壇)
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4樓2011-11-03 14:38:06
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