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苦茶暖心銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
免疫組化中的問題
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| 大家好，想問下做小鼠腦的冰凍切片時(shí)，甲醛固定后蔗糖梯度脫水時(shí)，配制蔗糖時(shí)感覺30%的蔗糖配制后溶液有點(diǎn)溫，可能是蔗糖溶解時(shí)放熱，想問下用不用把蔗糖溶液放到四度冰箱降溫再用，如果直接用的話，會(huì)不會(huì)增加免疫組化的非特異性染色？ |
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| 從我們做的經(jīng)驗(yàn)來看，不必進(jìn)行上述處理。冰凍切片后，晾干，然后用丙酮固定10-15min即可。如果沒有時(shí)間直接做下去，還可以用塑料袋包好切片盒，置于4度冰箱內(nèi)，在這樣的溫度與環(huán)境下，抗原不會(huì)消失。在做免疫組化時(shí)，取出，不必進(jìn)行枸椽酸緩沖液高溫抗原修改復(fù)；有時(shí)也不必進(jìn)行tritonX-100進(jìn)行細(xì)胞打孔，做免疫組化后沒有出現(xiàn)非特異性染色。 |
2樓2012-12-10 19:38:31
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5樓2013-10-19 20:51:15
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6樓2013-10-20 10:16:40
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