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[交流]
電泳中個(gè)條件與蛋白聚體的關(guān)系 已有4人參與
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我有個(gè)問題搞不懂啊，電泳中各個(gè)條件與蛋白是否解聚的關(guān)系，有以下幾點(diǎn)： 1.樣品煮沸能使蛋白解聚么？就是由亞基組成的蛋白解開成為單體 2.SDS能使由亞基組成的蛋白解聚么？ 3.SDS-PAGE中，很多人用含有2ME,SDS和 沒有2ME,有SDS的樣品處理液，根據(jù)結(jié)果斷定蛋白的亞基組成，這樣對(duì)么？ 4.如果SDS能使蛋白解聚，那么是不是只有用Native-PAGE才能鑒定蛋白的真實(shí)分子量啊？ 小妹是新人，希望同仁們指點(diǎn)啊，先謝過了。 |
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3樓2012-12-26 00:02:42
cicelyzh
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1. 煮沸樣品可以是蛋白質(zhì)變性。如果buffer中沒有象SDS之類的去垢劑不能使亞基之間的作用完全解開。 2. SDS可以破壞亞基之間的疏水作用和氫鍵，從而使多亞基復(fù)合體解聚。 3. 加入巰基乙醇的目的是把二硫鍵還原成-SH。有些蛋白質(zhì)會(huì)靠二硫鍵形成二聚體，或者有亞基之間二硫鍵，光靠SDS不能使其完全解開。 4. SDS-PAGE來(lái)判斷蛋白質(zhì)的分子量實(shí)際上的單體亞基的分子量。如果你需要確定多亞基組成的蛋白復(fù)合體的分子量，加入SDS會(huì)破壞亞基之間的作用，只有在native條件下做。 |
2樓2012-12-25 17:09:39
alicelchf
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4樓2012-12-26 11:18:45
5樓2012-12-26 12:26:26
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