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[交流]
電泳中個(gè)條件與蛋白聚體的關(guān)系 已有4人參與
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我有個(gè)問題搞不懂啊,電泳中各個(gè)條件與蛋白是否解聚的關(guān)系,有以下幾點(diǎn): 1.樣品煮沸能使蛋白解聚么?就是由亞基組成的蛋白解開成為單體 2.SDS能使由亞基組成的蛋白解聚么? 3.SDS-PAGE中,很多人用含有2ME,SDS和 沒有2ME,有SDS的樣品處理液,根據(jù)結(jié)果斷定蛋白的亞基組成,這樣對(duì)么? 4.如果SDS能使蛋白解聚,那么是不是只有用Native-PAGE才能鑒定蛋白的真實(shí)分子量。 小妹是新人,希望同仁們指點(diǎn)啊,先謝過了。 |

木蟲 (著名寫手)

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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1. 煮沸樣品可以是蛋白質(zhì)變性。如果buffer中沒有象SDS之類的去垢劑不能使亞基之間的作用完全解開。 2. SDS可以破壞亞基之間的疏水作用和氫鍵,從而使多亞基復(fù)合體解聚。 3. 加入巰基乙醇的目的是把二硫鍵還原成-SH。有些蛋白質(zhì)會(huì)靠二硫鍵形成二聚體,或者有亞基之間二硫鍵,光靠SDS不能使其完全解開。 4. SDS-PAGE來判斷蛋白質(zhì)的分子量實(shí)際上的單體亞基的分子量。如果你需要確定多亞基組成的蛋白復(fù)合體的分子量,加入SDS會(huì)破壞亞基之間的作用,只有在native條件下做。 |

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