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植化木蟲 (正式寫手)
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[求助]
Tris-鹽酸 緩沖試劑
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酶活實(shí)驗(yàn)需要用 50mM pH7.5 的Tris-鹽酸緩沖試劑，請問：我要怎么配置？ 買了Amresco的Tris-Hcl，固體100克。我很納悶為什么是Tris、鹽酸混在一起的一種固體。不應(yīng)該是Tris和鹽酸分開的，先溶解Tris再用鹽酸調(diào)pH嗎？是不是我買錯(cuò)了 今天配了100ml 50mM 的，測得pH值是4.27。為啥不是7.5？ 初做生物實(shí)驗(yàn)，請大蝦們不吝賜教 [ 來自科研家族 快樂家族 ] |
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應(yīng)該是分開配置儲備液的，不然怎么調(diào)PH？ Tris–鹽酸緩沖液（0.05M，25℃） 50毫升0.1M三羥甲基氨基甲烷（Tris）溶液與40.3毫升0.1N鹽酸混勻后，加水稀釋至100毫升。 三羥甲基氨基甲烷（Tris）分子量=121.14; 0. 1M溶液為12.114克/升。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳，使用時(shí)注意將瓶蓋嚴(yán)！ |
3樓2012-12-25 17:46:35
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2樓2012-12-25 17:24:32
【答案】應(yīng)助回帖
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TBS的配置是以Tris 計(jì)量的，你稱tris 在pH計(jì)上用鹽酸調(diào)即可。 買來的Tris 有 Tris base,和Tris-HCl 不同規(guī)格，這是廠家生產(chǎn)時(shí)，用HCl調(diào)過pH使其容易結(jié)晶，得到的產(chǎn)物就是 Tris-HCl！ TBS 的最佳pH范圍是8。0，PBS 是7。0 ， 另一個(gè)好處是TBS 不如PBS易長霉！ |
4樓2012-12-25 20:22:10
植化
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5樓2012-12-25 21:46:13
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6樓2012-12-26 09:16:21
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7樓2012-12-26 11:06:19
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植化9樓2013-02-28 12:11:29
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10樓2013-02-28 15:02:06
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