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七原秋也銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助巢氏PCR如何跳過(guò)3'內(nèi)擴(kuò)引物的位點(diǎn)
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最近用3’RACE克隆出一段序列,3'末端是ployA和3'通用引物。這段序列是不完全的,應(yīng)該還能繼續(xù)往下擴(kuò)增。但無(wú)論怎么繼續(xù)擴(kuò)增,都會(huì)卡在這個(gè)位置了,求高手幫忙指導(dǎo)一下,如何跳過(guò)這個(gè)位置繼續(xù)往下擴(kuò)增下去呢? 補(bǔ)充一下:這段序列的開(kāi)放閱讀框中沒(méi)有終止子和加尾信號(hào),并且ORF結(jié)尾正好在ployA的倒數(shù)第二個(gè)A上,BLAST的確是這個(gè)目的基因,但和文獻(xiàn)中的長(zhǎng)度相比遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。 [ Last edited by 七原秋也 on 2012-12-26 at 18:50 ] |
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