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cdmmore銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
pET31b雙酶切為何只有一條帶呀???
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| 各位大俠好,最近我用pET31b空質(zhì)粒做Nde1和Xho1雙酶切,兩酶之間大約有380 bp,但為何雙酶切后看不到380 bp的條帶呢???jī)煞N酶沒(méi)有問(wèn)題,已經(jīng)驗(yàn)證過(guò)單酶切都能切開,雙酶切也能切開,大小是對(duì)的,但就是沒(méi)有切下來(lái)的小片段,這是為何呀??? |
銅蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
至尊木蟲 (正式寫手)
| 其實(shí)應(yīng)該是你沒(méi)看見(jiàn),條帶亮度都是和質(zhì)量成正比的,你切下來(lái)的380bp片度與你的質(zhì)粒摩爾量是一樣的,那么你能期待它有多亮。ü烙(jì)只有你質(zhì)粒亮度的十幾分之一)?我覺(jué)得仔細(xì)看還是有的,不過(guò)用成像系統(tǒng)估計(jì)是看不見(jiàn)的。做分子的眼睛都是練出來(lái)的,特別是一些先雙酶切再膠回收的,經(jīng)常看不清! |

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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