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thinkerboy鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
怎么確定變性和退火溫度
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我反轉(zhuǎn)錄成cDNA第一鏈后,以cDNA第一鏈為模板進行PCR反應(yīng),該怎么設(shè)置循環(huán)條件,需要94℃預(yù)變性么退火溫度怎么確定,我用的是invitrogen合成的引物,它給了兩個退火溫度,一個是1M Na+ 的TM為66.5和67.9值,另一個是50mM Na+的TM為44.9和46.3值,這該怎么確定他的退火溫度。 [ Last edited by thinkerboy on 2013-1-2 at 22:54 ] |
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