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RNA PCR有關(guān)問(wèn)題
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hi，大家好： 請(qǐng)問(wèn)大家有沒(méi)有做RNA PCR的，對(duì)于一條序列未知的RNA怎么PCR呢？有沒(méi)有RNA PCR相關(guān)的通用引物。謝謝 |
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2樓2013-01-04 15:38:47
cicelyzh
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3樓2013-01-04 15:39:14
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
amisking: 回帖置頂 2013-01-04 20:01:58
amisking: 金幣+3, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流問(wèn)題。 2013-01-04 20:02:05
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amisking: 金幣+3, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流問(wèn)題。 2013-01-04 20:02:05
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上面回答有兩次筆誤，一是PolyT；二，是隨機(jī)引物不是隨機(jī)引物不是簡(jiǎn)并引物。 你的RNA中是否有PolyA,若有可用PolyT作為一條引物，另外一條可用6個(gè)或8個(gè)核苷酸的隨機(jī)引物。擴(kuò)增出片段之后測(cè)序。再做inverse PCR (IPCR)(Huang, Molecular Biotechnology,2: 15–22.1994).就可以得到側(cè)翼的序列 。 |
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leezz4樓2013-01-04 15:42:53
5樓2013-01-04 15:49:40
6樓2013-01-04 17:20:33
7樓2013-01-04 17:21:28
8樓2013-01-04 17:21:53
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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leezz: 金幣+2 2013-01-05 08:32:52
leezz: 金幣+2 2013-01-05 08:32:52
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一步RT-PCR不是把反轉(zhuǎn)錄和PCR合并成一次反應(yīng)實(shí)現(xiàn)嗎。PCR的還是DNA吧，如果是RNA是不能PCR的。PCR是DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。RNA沒(méi)有這個(gè)反應(yīng)。 |
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9樓2013-01-05 08:06:21
cicelyzh
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10樓2013-01-05 08:09:45
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