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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告
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淺笑包包

新蟲 (小有名氣)

[求助] assay of ribonuclease activity

Ten microliters of protein (0.25 mgÆml)1) and 10 ll of saffron leaf total RNA (10 lgÆll)1) were mixed with 100 ll 50 mm MES (pH 6.0) and incubated at 50 C for 30 min. The reaction was stopped by adding 1 ml of ice-cold 4 m LiCl to the mixture, and incubated in ice for 15 min. Insoluble leaf total RNA was removed by centrifugation (10,000 g) for 15 min at 4 C. The supernatant containing soluble leaf total RNA was quantified by UV absorbance at 260 nm in a spectrophotometer (Lan Optics). One unit of enzyme was defined as the amount of protein causing an increase of absorption of 1.0 after 30 min of incubation. The positive and negative controls were RNase A and the heated CsPR10 (100 C for 10 min), respectively.

上述來自文獻(xiàn) 請(qǐng)問是什么意思?為什么要把蛋白質(zhì)與RNA融合?融合后又如何表達(dá)出了它的核糖核苷酸活性?
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cicelyzh

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
淺笑包包: 金幣+8, ★★★很有幫助 2013-01-07 14:48:18
ribonuclease是RNA酶,也就是通常我們說的RNase。實(shí)驗(yàn)非常簡(jiǎn)單,是在RNA中加入RNase測(cè)定RNase的活性。然后通過測(cè)紫外吸收,如果RNA被降解,吸收減小。
2樓2013-01-07 06:35:38
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淺笑包包

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-07 06:35:38
ribonuclease是RNA酶,也就是通常我們說的RNase。實(shí)驗(yàn)非常簡(jiǎn)單,是在RNA中加入RNase測(cè)定RNase的活性。然后通過測(cè)紫外吸收,如果RNA被降解,吸收減小。

“One unit of enzyme was defined as the amount of protein causing an increase of absorption of 1.0 after 30 min of incubation“
這又是什么意思?
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3樓2013-01-07 15:00:25
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cicelyzh

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

就是用酶消化RNA底物30分鐘,使其260nm吸光值減小1就定義為一個(gè)U。
4樓2013-01-08 08:10:01
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淺笑包包

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
4樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-08 08:10:01
就是用酶消化RNA底物30分鐘,使其260nm吸光值減小1就定義為一個(gè)U。

“increase of absorption of 1.0”不是增加1嗎?
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5樓2013-01-08 09:08:31
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cicelyzh

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

引用回帖:
5樓: Originally posted by 淺笑包包 at 2013-01-08 09:08:31
“increase of absorption of 1.0”不是增加1嗎?...

不好意思沒注意啊,我覺得應(yīng)該是減小才對(duì)呢。
6樓2013-01-08 09:15:27
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淺笑包包

新蟲 (小有名氣)

引用回帖:
6樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-08 09:15:27
不好意思沒注意啊,我覺得應(yīng)該是減小才對(duì)呢。...

哦,那應(yīng)該是增加嗎?我是不太明白。
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7樓2013-01-09 14:45:55
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cicelyzh

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

引用回帖:
7樓: Originally posted by 淺笑包包 at 2013-01-09 14:45:55
哦,那應(yīng)該是增加嗎?我是不太明白。...

酶是分解RNA的,我認(rèn)為應(yīng)該是減小啊。
8樓2013-01-09 14:51:17
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hqsinberg

木蟲 (著名寫手)

清風(fēng)小木蟲

★ ★
1949stone: 金幣+2, 金幣鼓勵(lì) 看樓主的認(rèn)可程度 在考慮epi 2013-01-09 15:24:32
引用回帖:
8樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-09 14:51:17
酶是分解RNA的,我認(rèn)為應(yīng)該是減小啊。...

吸光值是增加,n個(gè)單獨(dú)的單個(gè)核苷酸的吸光值比其連接起來要大。原因:堿基堆積非共價(jià)鍵作用力造成的堿基壓縮在一起,部分堿基的吸光值表現(xiàn)不出來。

» 本帖已獲得的紅花(最新10朵)

9樓2013-01-09 14:54:50
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淺笑包包

新蟲 (小有名氣)

送鮮花一朵
引用回帖:
9樓: Originally posted by hqsinberg at 2013-01-09 14:54:50
吸光值是增加,n個(gè)單獨(dú)的單個(gè)核苷酸的吸光值比其連接起來要大。原因:堿基堆積非共價(jià)鍵作用力造成的堿基壓縮在一起,部分堿基的吸光值表現(xiàn)不出來。...

謝謝~
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10樓2013-01-10 08:43:46
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