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jasminezhao

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[交流] PCR 點(diǎn)突變測(cè)序已有1人參與

我想請(qǐng)教一下各位：我做點(diǎn)突變PCR，用的是QuikChange® II XL Site-Directed
Mutagenesis Kit試劑盒，我想知道的是在獲得單克隆抗體時(shí)，對(duì)其進(jìn)行之力提純，再送去測(cè)序之前是否要對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，如果需要要怎么進(jìn)行檢測(cè)，還是提完質(zhì)粒之后直接送去測(cè)序？謝謝！

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1樓 2013-01-07 16:56:16

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ccharlien

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不需要再檢測(cè)，直接測(cè)序就可以了。檢測(cè)點(diǎn)突變費(fèi)時(shí)費(fèi)力，成本比測(cè)序大的多。

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2樓2013-01-07 17:44:52

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jasminezhao

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2樓: Originally posted by ccharlien at 2013-01-07 17:44:52
不需要再檢測(cè)，直接測(cè)序就可以了。檢測(cè)點(diǎn)突變費(fèi)時(shí)費(fèi)力，成本比測(cè)序大的多。

哦，那若果是用雙酶切做的話，得到的克隆提質(zhì)粒后是不是要進(jìn)行雙酶切檢測(cè)，再送去測(cè)序��？？謝謝

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3樓2013-01-07 20:56:57

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引用回帖:

3樓: Originally posted by jasminezhao at 2013-01-07 20:56:57
哦，那若果是用雙酶切做的話，得到的克隆提質(zhì)粒后是不是要進(jìn)行雙酶切檢測(cè)，再送去測(cè)序�。�？謝謝...

雙酶切做?你指的是普通的質(zhì)粒構(gòu)建么？
可以酶切也可以不切
我現(xiàn)在都不做酶切了直接測(cè)序的
如果克隆長(zhǎng)的數(shù)量奇怪才會(huì)做酶切看一下

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4樓2013-01-07 23:07:58

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