 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1658 | 回復(fù): 17 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
ym6104金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
長(zhǎng)片段的連接轉(zhuǎn)化問(wèn)題，望大俠們賜教！
|
|
| 新手一枚，現(xiàn)在在擴(kuò)兩個(gè)3000bp左右的基因，做TA克隆，PCR的條帶很亮，膠回收后跑瓊脂糖檢測(cè)條帶也挺亮，用的是TAKARA 的LA TAQ，之后用TAKARA的PMD-19連接過(guò)夜，再用全式金的T1感受態(tài)轉(zhuǎn)化，涂板之后也長(zhǎng)菌了，但沒(méi)有之前擴(kuò)短片段的時(shí)候多，做菌落PCR檢測(cè)卻什么條帶也沒(méi)有�，F(xiàn)在覺(jué)得是片段太長(zhǎng)沒(méi)有連接上，所以想請(qǐng)教一下各位，有什么改進(jìn)的辦法嗎？還是說(shuō)得分段擴(kuò)增，那分段的話在分的片段的太小和引物設(shè)計(jì)上有什么要求嗎？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有281人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 各位大俠們有沒(méi)有做多孔不銹鋼的，進(jìn)來(lái)賜教賜教……
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 淬火油冷冷速問(wèn)題，請(qǐng)大俠賜教！
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 請(qǐng)各位大俠賜教啊：一個(gè)關(guān)于公派聯(lián)合培養(yǎng)的問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 浙大藥學(xué)院考博相關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)大俠們賜教
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 大環(huán)內(nèi)酯類的藥物為什么苦？！哪位大俠能否賜教一下�。�
已經(jīng)有16人回復(fù)
- ansys溫度場(chǎng)的模擬出現(xiàn)了問(wèn)題 求大俠賜教
已經(jīng)有5人回復(fù)
- proof遇到的困惑，第一次發(fā)SCI，什么都不懂，懇請(qǐng)大俠們賜教
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】還是啟動(dòng)子問(wèn)題，急求大俠賜教啊��！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】長(zhǎng)片段的連接轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
ym6104
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 809.8
- 帖子: 215
- 在線: 54.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1073082
- 注冊(cè): 2010-08-11
- 專業(yè): 生物化學(xué)
9樓2013-01-10 23:00:25
2樓2013-01-10 20:50:18
ccharlien
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 82 (初中生)
- 金幣: 2630.1
- 紅花: 3
- 帖子: 334
- 在線: 180.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1168776
- 注冊(cè): 2010-12-13
- 性別: GG
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
ym6104: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-01-11 09:33:37
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
ym6104: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-01-11 09:33:37
|
你做菌落PCR用的什么引物�。咳绻呛涂寺∫粯拥囊锸怯锌赡軘U(kuò)不出來(lái)的，從質(zhì)粒上擴(kuò)出3000和從菌液中擴(kuò)出3000還是會(huì)有點(diǎn)差別的 一般做菌落PCR一端用載體上的通用引物一端用片段上的引物，片段小一些保證效率 比如一個(gè)T7正向+基因5‘端的反向引物 基因3‘端的正向引物+BGH反向引物 這樣把方向確定好 選對(duì)的測(cè)序 |
3樓2013-01-10 21:05:10
ym6104
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 809.8
- 帖子: 215
- 在線: 54.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1073082
- 注冊(cè): 2010-08-11
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2013-01-10 21:10:24
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 334分 一志愿武理 材料求調(diào)劑 +6 | 李李不服輸 2026-03-26 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +8 | 蕉蕉123 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 311（085601）求調(diào)劑 +4 | liziyeyeye 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
[考研] 320分，材料與化工專業(yè)，求調(diào)劑 +9 | 一定上岸aaa 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 【求調(diào)劑】085601材料工程專碩 | 總分272 | +6 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +6 | kotoko_ik 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | Pigcasso 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 | Russ_ss 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | lim0922 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +4 | 王了個(gè)楠 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +7 | 蛋黃咸肉粽 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 342求調(diào)劑 +3 | 加油a李zs 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +3 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求調(diào)劑 +4 | 李李不服輸 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 336化工調(diào)劑 +4 | 王大坦1 2026-03-23 | 5/250 |
|