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lflishan木蟲 (正式寫手)
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[求助]
western blot抗體選擇與操作
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| 如果一塊膠轉(zhuǎn)膜后需要用兩種抗體,可以同時加兩種抗體孵育嗎?具體怎么操作呢?實(shí)驗(yàn)室沒有人做過,急求助。。。另外,如果一種抗體是兔源的,而actin是鼠源的,二抗只有抗兔的,能用嗎 |
木蟲 (正式寫手)
銀蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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1. 如果兩個目標(biāo)蛋白在膠上的位置有明顯差別是可以的,如果你不在乎把一抗混合的話。如果同時做,注意兩個抗體的檢出限要差不多。如果一個抗體很弱一個很強(qiáng)的話,效果會很不好。我一般是孵育完一個一抗,洗膜后直接放另一個一抗孵育,這樣可以根據(jù)抗體的靈敏程度確定孵育時間的長短。洗膜后加二抗,兩個一起檢測。 2. 肯定不行的。二抗是識別一抗的IgG, 抗兔的二抗只能識別兔的一抗。 |
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