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liuliancy鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
氨基酸DABS-Cl柱前衍生HPLC測定
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請教各位做氨基酸檢測用的是什么檢測方法啊？最近用DABS-Cl柱前衍生，總是衍生不好，用的美國藥典的方法，大致如下：樣品溶于50mM的碳酸氫鈉溶液，衍生試劑是1.3mg DABS-Cl溶于1ml乙腈，終止液是50mM ph 7.0 的磷酸鈉緩沖液與乙醇1:1混合，流動(dòng)相為 A--25mM醋酸鈉（ph6.5）含DMF4%，B--乙腈。 衍生步驟：取20ul樣品溶液于離心管中，加40ul DABS-Cl，70℃水浴加熱10min，期間不斷搖勻，最后加60ul終止液。 液相條件：島津液相，波長 436nm，柱子 4.6×150mm，溫度40℃，流速1ml/min，0-20min 流動(dòng)相A 85%，20-32 流動(dòng)相A 60%，32-34流動(dòng)相A 30%。 附件為美國藥典原文，不知道是理解錯(cuò)誤還是哪里的問題，柱子可能不對，藥典用的250mm的柱子，請各位幫忙看看，謝了！�。∵�有一篇也照著做過，也沒做出來，希望大家給指導(dǎo)下........[ 來自科研家族 生物醫(yī)藥家族 ] |
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- 附件 2 : DABS_Cl柱前衍生RP_HPLC法定量測定血清中游離氨基酸.pdf
2013-01-26 11:48:30, 159.5 K
2013-01-26 11:48:31, 172.64 K
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