 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2003 | 回復(fù): 10 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
從基因文庫(kù)中篩選到目的基因后的分析
|
|||
|
各位蟲友：本人前段時(shí)間從構(gòu)建好的基因文庫(kù)中通過功能篩選，篩選到了一株陽性克隆。接著對(duì) 測(cè)序結(jié)果在NCBI中比對(duì)，沒有能和測(cè)出的結(jié)果比對(duì)上的。因此不知道這段序列編碼的是什么酶。 接著把測(cè)出的序列用Vector NTI進(jìn)行ORF分析，如果 將正向測(cè)序結(jié)果輸入（以M13+向開始）顯示整個(gè)序列被分成很多個(gè)ORF,并且最大ORF也只不過500bp，我想這應(yīng)該不足以編碼我的目標(biāo)蛋白（酰胺酶，實(shí)驗(yàn)室克隆出的相同功能的酰胺酶700多bp）；如果將反向的測(cè)序結(jié)果輸入（以M13-向開始）顯示大致可以分倆個(gè)閱讀框，一個(gè)1600bp左右，一個(gè)有700bp左右。 對(duì)于這樣的結(jié)果我不知道該怎么分析，怎么設(shè)計(jì)引物克隆出目標(biāo)編碼基因？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有300人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 構(gòu)建基因文庫(kù)的方法篩選到陽性克隆，克隆中插入的基因長(zhǎng)為8000bp，如何找到目的基因？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 請(qǐng)問將目的基因轉(zhuǎn)化到細(xì)胞中,但是目的基因再整合到染色體上是什么原理?
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 內(nèi)參基因篩選的問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 蔗糖致死雙交換篩選
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 怎樣分析基因組序列？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 常用藥物篩選基因
已經(jīng)有3人回復(fù)
- ITS 構(gòu)建克隆文庫(kù)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 如何對(duì)一堆基因進(jìn)行分類分析
已經(jīng)有6人回復(fù)
- fosmide克隆文庫(kù)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 怎么篩選植物抗性基因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】基因序列的分析
已經(jīng)有5人回復(fù)
dmzha
鐵桿木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 7226.1
- 散金: 650
- 帖子: 238
- 在線: 354.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 808006
- 注冊(cè): 2009-07-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hraikeyan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-06 09:05:19
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，鼓勵(lì)應(yīng)助，分子生物版塊期待你的更多精彩。 2013-04-17 09:57:53
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hraikeyan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-06 09:05:19
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，鼓勵(lì)應(yīng)助，分子生物版塊期待你的更多精彩。 2013-04-17 09:57:53
| 你都知道序列怎么會(huì)克隆不出目標(biāo)編碼基因呢？在分析的ORF（個(gè)人認(rèn)為應(yīng)該是反向測(cè)序結(jié)果）兩端設(shè)計(jì)引物就行了，然后在大腸桿菌中表達(dá)，得到的可溶性蛋白再進(jìn)行酶學(xué)性質(zhì)鑒定。如果在NCBI中沒有比對(duì)上，估計(jì)是新基因的可能性比較大。PS：就算是新基因，在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中多少還是有同源性不是很高的基因存在。 |
5樓2013-03-04 21:34:07
qqxs
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 61 (初中生)
- 金幣: 3933.3
- 散金: 1003
- 紅花: 4
- 帖子: 337
- 在線: 40.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1108858
- 注冊(cè): 2010-09-27
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
4樓2013-03-04 17:47:24
6樓2013-03-06 09:05:08
dmzha
鐵桿木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 7226.1
- 散金: 650
- 帖子: 238
- 在線: 354.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 808006
- 注冊(cè): 2009-07-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
7樓2013-03-07 10:40:08
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319 +13 | 678lucky 2026-03-31 | 13/650 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑 +11 | 景隨風(fēng) 2026-03-29 | 16/800 |
|
|
[考研] 08工科，295，接受跨專業(yè)調(diào)劑 +6 | lmnlzy 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國(guó)科學(xué)院大學(xué)265求調(diào)劑 +6 | 恬淡ye 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +10 | 深V宿舍吧 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑（331分） +8 | 111@127 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求收留 +6 | 1943443204 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)321分求調(diào)劑 +10 | 三dd. 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程找調(diào)劑 +17 | oatmealR 2026-03-29 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 26考研-291分-廈門大學(xué)（085601）-柔性電子學(xué)院材料工程專業(yè)求調(diào)劑 +5 | min3 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +10 | 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分 +7 | Shern—- 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +13 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | dfffsar 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 一志愿廈門大學(xué)化學(xué)學(xué)碩307求調(diào)劑
+10
|
y7czhao 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +7 | A child 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 330一志愿中國(guó)海洋大學(xué) 化學(xué)工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 零八# 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個(gè)好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 林之夕 2026-03-24 | 6/300 |
|