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cathereen_li新蟲 (初入文壇)
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[求助]
我要擴(kuò)3kb的片段，人的GLDC基因，總是擴(kuò)不出來，求大俠指點(diǎn)呀 已有2人參與
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| 我要擴(kuò)增3kb的片段，人的GLDC基因的cDNA，總是擴(kuò)不出來，求大俠指點(diǎn)呀！！試過了各種辦法，兩步法也試過了，一開始用pfu酶，后來用taq酶，LA taq也用過了，都P不出來，用taqP出來了一個(gè)，但是大小不對(duì)。我的體系為25微升體系，程序與體系如下：94度，3分鐘；94度，45秒，55度，40秒，72度3分半，30個(gè)循環(huán)；72度8分鐘。體系：上下游引物各一微升，模板視濃度而定，一般為2到5微升，buffer為2.5微升，dNTP為1.5微升，酶為1微升，補(bǔ)水到25微升。小女子論壇新手，金幣不太足，還請(qǐng)各位大俠多多包涵~~~~ |
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cathereen_li
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4樓2013-03-04 21:59:21
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