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[求助]
組織樣本酶活性高,酶基因RT-PCR后表達(dá)水平低
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各位蟲友賜教! 本人最近做了RT-PCR。出現(xiàn)些問題。大致如下: 1.測(cè)定組織樣本中幾種酶的活性,結(jié)果活性高。 2. 做了這幾個(gè)酶對(duì)應(yīng)基因的RT-PCR,結(jié)果三個(gè)酶基因蛋白表達(dá)量并無顯著差異。 請(qǐng)問,最后討論的時(shí)候應(yīng)該從那方面入手呢,要怎么討論? 本人外行,對(duì)分子生物只是略懂皮毛,知道酶活性高,但最終對(duì)應(yīng)的蛋白表達(dá)不一定高,那是什么影響了它的表達(dá)呢,是在表達(dá)的過程中修飾了,還是別的什么?謝謝! 在線等。! |

榮譽(yù)版主 (著名寫手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +24 |

木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)

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我是做運(yùn)動(dòng)損傷的,這兩種酶是生物體內(nèi)內(nèi)源性抗氧化防御系統(tǒng)中的主要酶(還有一種是GSH-Px),它們與自由基之間處于一種動(dòng)態(tài)平衡,當(dāng)機(jī)體劇烈運(yùn)動(dòng)或者處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),機(jī)體氧化磷酸化作用增強(qiáng),從而產(chǎn)生足夠的能量維持機(jī)體的需要,但同時(shí)也導(dǎo)致了自由基的產(chǎn)生增多,zhe 將導(dǎo)致脂質(zhì)出現(xiàn)氧化損傷。由于脂質(zhì)是細(xì)胞或者細(xì)胞器的生物膜的重要組成成分,因此脂質(zhì)的氧化損傷可導(dǎo)致細(xì)胞或者細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)損傷和功能障礙。線粒體是細(xì)胞進(jìn)行呼吸鏈和氧化磷酸化反應(yīng)的主要場(chǎng)所,因此線粒體既是氧自由基生成的主要場(chǎng)所也是易受自由基攻擊的部位。氧自由基不僅會(huì)導(dǎo)致肌肉線粒體膜損傷,使呼吸鏈產(chǎn)生ATP的過程受阻,而且將損傷肌漿網(wǎng)膜使鈣離子大量釋放到胞漿,使肌肉收縮能力下降。此外,氧自由基還可導(dǎo)致紅細(xì)胞膜出現(xiàn)結(jié)構(gòu)損傷,使紅細(xì)胞脆性增大,變形性和流動(dòng)性下降,出現(xiàn)紅細(xì)胞溶血。 所以,給藥后如果測(cè)定的SOD和CAT酶活性升高,則說明它們清除氧自由基的能力增強(qiáng),即可以解釋為藥物能減少由自由基帶來的氧化損傷,達(dá)到延緩疲勞的作用。 自己的一點(diǎn)看法,歡迎交流。 |

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