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[求助]
組織樣本酶活性高,酶基因RT-PCR后表達(dá)水平低
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各位蟲友賜教! 本人最近做了RT-PCR。出現(xiàn)些問題。大致如下: 1.測定組織樣本中幾種酶的活性,結(jié)果活性高。 2. 做了這幾個酶對應(yīng)基因的RT-PCR,結(jié)果三個酶基因蛋白表達(dá)量并無顯著差異。 請問,最后討論的時候應(yīng)該從那方面入手呢,要怎么討論? 本人外行,對分子生物只是略懂皮毛,知道酶活性高,但最終對應(yīng)的蛋白表達(dá)不一定高,那是什么影響了它的表達(dá)呢,是在表達(dá)的過程中修飾了,還是別的什么?謝謝! 在線等!! |

金蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
榮譽(yù)版主 (著名寫手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +24 |

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我是做運(yùn)動損傷的,這兩種酶是生物體內(nèi)內(nèi)源性抗氧化防御系統(tǒng)中的主要酶(還有一種是GSH-Px),它們與自由基之間處于一種動態(tài)平衡,當(dāng)機(jī)體劇烈運(yùn)動或者處于應(yīng)激狀態(tài)時,機(jī)體氧化磷酸化作用增強(qiáng),從而產(chǎn)生足夠的能量維持機(jī)體的需要,但同時也導(dǎo)致了自由基的產(chǎn)生增多,zhe 將導(dǎo)致脂質(zhì)出現(xiàn)氧化損傷。由于脂質(zhì)是細(xì)胞或者細(xì)胞器的生物膜的重要組成成分,因此脂質(zhì)的氧化損傷可導(dǎo)致細(xì)胞或者細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)損傷和功能障礙。線粒體是細(xì)胞進(jìn)行呼吸鏈和氧化磷酸化反應(yīng)的主要場所,因此線粒體既是氧自由基生成的主要場所也是易受自由基攻擊的部位。氧自由基不僅會導(dǎo)致肌肉線粒體膜損傷,使呼吸鏈產(chǎn)生ATP的過程受阻,而且將損傷肌漿網(wǎng)膜使鈣離子大量釋放到胞漿,使肌肉收縮能力下降。此外,氧自由基還可導(dǎo)致紅細(xì)胞膜出現(xiàn)結(jié)構(gòu)損傷,使紅細(xì)胞脆性增大,變形性和流動性下降,出現(xiàn)紅細(xì)胞溶血。 所以,給藥后如果測定的SOD和CAT酶活性升高,則說明它們清除氧自由基的能力增強(qiáng),即可以解釋為藥物能減少由自由基帶來的氧化損傷,達(dá)到延緩疲勞的作用。 自己的一點(diǎn)看法,歡迎交流。 |

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