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1988bobo新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助ACE抑制活性的測(cè)定方法指導(dǎo),越細(xì)致越好
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剛?cè)胧諥CE抑制的實(shí)驗(yàn),不知怎么開始。 我的ACE0.1u的和0.25u的,請(qǐng)問測(cè)定的時(shí)候怎么稀釋呢?稀釋是解凍之后還是直接把水注入試劑小瓶中?5mmol 馬尿酰組氨酸亮氨酸怎么配制呢?中間還有很多疑問,希望能有好心人,咱們私下聯(lián)系一下交流,多謝了!這是我參照的方法 本試驗(yàn)采取體外檢測(cè)法,取100μLHHL(5mmol/L)和40μL水解物混合于37℃下保溫3min后,加入ACE(0.03mgACE與600μL去離子水混合)10μL,混勻后于37℃下保溫30min,再加入250μL的1mol/L HCl,終止反應(yīng),再加入1.7mL的乙酸乙酯經(jīng)15s振蕩后,以10000r/min離心10min,吸取1.0mL的乙酸乙酯層,放入85℃烘箱干燥1h,加入3mL去離子水,混勻后于228nm下測(cè)定吸光值。對(duì)照組除了不加抑制劑,空白組除在反應(yīng)前后加入0.2mL 1mol/L HCl外,其余操作與反應(yīng)管相同。 |
金蟲 (小有名氣)
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