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1988bobo新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助ACE抑制活性的測定方法指導(dǎo)，越細致越好
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剛?cè)胧諥CE抑制的實驗，不知怎么開始。 我的ACE0.1u的和0.25u的，請問測定的時候怎么稀釋呢？稀釋是解凍之后還是直接把水注入試劑小瓶中？5mmol 馬尿酰組氨酸亮氨酸怎么配制呢？中間還有很多疑問，希望能有好心人，咱們私下聯(lián)系一下交流，多謝了！這是我參照的方法 本試驗采取體外檢測法，取100μLHHL（5mmol/L）和40μL水解物混合于37℃下保溫3min后，加入ACE（0.03mgACE與600μL去離子水混合）10μL，混勻后于37℃下保溫30min，再加入250μL的1mol/L HCl，終止反應(yīng)，再加入1.7mL的乙酸乙酯經(jīng)15s振蕩后，以10000r/min離心10min，吸取1.0mL的乙酸乙酯層，放入85℃烘箱干燥1h，加入3mL去離子水，混勻后于228nm下測定吸光值。對照組除了不加抑制劑，空白組除在反應(yīng)前后加入0.2mL 1mol/L HCl外，其余操作與反應(yīng)管相同。 |
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雪卡yu
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2樓2013-03-28 16:01:46
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