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[求助] SDS 提取液如何配置

SDS提取液(包括100mmol/L Tris-HCl(pH8.0)，50mmol/L EDTA，250mmol/L NaCl)
是不是按照1L溶液算Tris-HCl EDTA，NaCl 分子量需要往溶液添加多少量就行，最后調(diào)pH

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1樓 2013-03-14 10:41:40

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Ｔｒｉｓ�。瑁悖� EDTA�。危幔悖熳詈孟扰涑筛邼舛饶敢�，計(jì)算好，再按體積混合成需要濃度。

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2樓2013-03-14 12:22:12

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引用回帖:

2樓: Originally posted by gqstar at 2013-03-14 12:22:12
Ｔｒｉｓ　ｈｃｌ EDTA�。危幔悖熳詈孟扰涑筛邼舛饶敢�，計(jì)算好，再按體積混合成需要濃度。

那Tris-HCl 的pH=8，原來(lái)配Tris直接配成8？那原液Tris的濃度是1mol和10mol用的酸是不一樣

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3樓2013-03-14 13:04:15

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海之子211: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-03-14 15:57:41

引用回帖:

3樓: Originally posted by 海之子211 at 2013-03-14 13:04:15
那Tris-HCl 的pH=8，原來(lái)配Tris直接配成8？那原液Tris的濃度是1mol和10mol用的酸是不一樣...

分別調(diào)。
參考一下體系：
試驗(yàn)?zāi)康?br /> 1 明確提取液的配制原理
2 通過(guò)對(duì)提取液的配制，掌握提取液中各試劑在提取中的作用。
實(shí)驗(yàn)原理
DNA 是遺傳物質(zhì), 植物DNA 的提取是植物基因工程的基礎(chǔ)。通常要求所提取的DNA 要有理想的純度,足夠完整,無(wú)斷裂降解,提取過(guò)程盡量少使用有毒化學(xué)品等。為了達(dá)到上述要求,已報(bào)道了不少提取植物DNA 的方法,歸納起來(lái),主要有CTAB 法、SDS法和堿提取法。DNA分子是分子生物學(xué)研究的基本材料, 依不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目刹扇〔煌某樘岱椒ǐ@取數(shù)量和質(zhì)量不等的DNA。因此提取液里試劑的配比也有所不同：植物DNA的抽提常采用CTAB方法：
配方如下：
1 配制提取液之前，先配制母液。
母液（滅菌）：5M NaCl ( 58.4g加ddH2O制成200ml溶液)
0.5M Na2-EDTA(37.22g+ddH2O至200ml,用NaOH調(diào)pH值為8.0)
1M Tris-HCl(12.11gTris-HCl+ ddH2O至100ml,用濃鹽酸調(diào)pH值至8.0)
2 提取液配方
                              100ml
加入：CTAB粉劑                2g
   1M Tris(pH8.0)          10ml
   0.5M EDTA(pH8.0)       4ml
   5M NaCl                28ml
   PVP                      1g
  β-巰基乙醇             1ml
  加雙蒸水定容至100ml
3  抽提液
分別量取苯酚、氯仿、異戊醇按25：24：1的體積比混合，再分別量取氯仿、異戊醇按24：1的體積比混合，配制成兩種抽提液，各配制100ml
4 0.1xTE
1mlTris，20μl EDTA中加H2O, 用HCl調(diào)pH至8.0, 定溶，滅菌

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4樓2013-03-14 13:10:04

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引用回帖:

4樓: Originally posted by gqstar at 2013-03-14 13:10:04
分別調(diào)。
參考一下體系：
試驗(yàn)?zāi)康?br /> 1 明確提取液的配制原理
2 通過(guò)對(duì)提取液的配制，掌握提取液中各試劑在提取中的作用。
實(shí)驗(yàn)原理
DNA 是遺傳物質(zhì), 植物DNA 的提取是植物基因工程的基礎(chǔ)。通常要求所提取的D ...

我要從扇貝糞便中提取DNA，做pcr

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5樓2013-03-14 14:47:19

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2樓: Originally posted by gqstar at 2013-03-14 12:22:12
Ｔｒｉｓ�。瑁悖� EDTA�。危幔悖熳詈孟扰涑筛邼舛饶敢�，計(jì)算好，再按體積混合成需要濃度。

Ｔｒｉｓ　ｈｃｌ的母液濃度是多少？這是固定值？

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6樓2013-03-14 15:56:15

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Tris-HCl 的母液是固定1m？

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7樓2013-03-14 15:58:32

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zhangxingc: 金幣+8, 鼓勵(lì)熱心回帖應(yīng)助 2013-03-15 12:58:45

引用回帖:

7樓: Originally posted by 海之子211 at 2013-03-14 15:58:32
Tris-HCl 的母液是固定1m？...

1mol/L
濃度。怕不對(duì)自己算一下。

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8樓2013-03-14 17:33:29

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