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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » SDS 提取液如何配置
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海之子211新蟲 (小有名氣)
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[求助]
SDS 提取液如何配置
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SDS提取液(包括100mmol/L Tris-HCl(pH8.0)，50mmol/L EDTA，250mmol/L NaCl) 是不是按照1L溶液 算Tris-HCl EDTA，NaCl 分子量 需要往溶液添加多少量就行，最后調pH |
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海之子211
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3樓2013-03-14 13:04:15
2樓2013-03-14 12:22:12
【答案】應助回帖
★ ★
海之子211: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-03-14 15:57:41
海之子211: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-03-14 15:57:41
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分別調。 參考一下體系： 試驗目的 1 明確提取液的配制原理 2 通過對提取液的配制，掌握提取液中各試劑在提取中的作用。 實驗原理 DNA 是遺傳物質, 植物DNA 的提取是植物基因工程的基礎。通常要求所提取的DNA 要有理想的純度,足夠完整,無斷裂降解,提取過程盡量少使用有毒化學品等。為了達到上述要求,已報道了不少提取植物DNA 的方法,歸納起來,主要有CTAB 法、SDS法和堿提取法。DNA分子是分子生物學研究的基本材料, 依不同的實驗目的可采取不同的抽提方法獲取數(shù)量和質量不等的DNA。因此提取液里試劑的配比也有所不同：植物DNA的抽提常采用CTAB方法： 配方如下： 1 配制提取液之前，先配制母液。 母液（滅菌）：5M NaCl ( 58.4g加ddH2O制成200ml溶液) 0.5M Na2-EDTA(37.22g+ddH2O至200ml,用NaOH調pH值為8.0) 1M Tris-HCl(12.11gTris-HCl+ ddH2O至100ml,用濃鹽酸調pH值至8.0) 2 提取液配方 100ml 加入：CTAB粉劑 2g 1M Tris(pH8.0) 10ml 0.5M EDTA(pH8.0) 4ml 5M NaCl 28ml PVP 1g β-巰基乙醇 1ml 加雙蒸水定容至100ml 3 抽提液 分別量取苯酚、氯仿、異戊醇按25：24：1的體積比混合，再分別量取氯仿、異戊醇按24：1的體積比混合，配制成兩種抽提液，各配制100ml 4 0.1xTE 1mlTris，20μl EDTA中加H2O, 用HCl調pH至8.0, 定溶，滅菌 |
4樓2013-03-14 13:10:04
海之子211
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5樓2013-03-14 14:47:19
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