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[求助]
dgge最后一次分離切膠后用不帶GC夾子引物擴(kuò)增不出目的條帶
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又來(lái)請(qǐng)教大家了。如題還是PCR擴(kuò)增不出，之前用于做DGGE的pcr用B968F-GC和B1401R效果很好，長(zhǎng)度不到500bp，現(xiàn)在切完膠要測(cè)序了，用B968F擴(kuò)不出來(lái)了，它與B968F-GC的序列是一樣的啊，為什么出不來(lái)呢？？？？？ 我試了做引物濃度梯度，模板濃度梯度，退火溫度梯度，降落PCR也試過(guò)了，都不行，不帶GC夾的引物幾乎都擴(kuò)出來(lái)了��！ 今天用DNA模板做不帶GC夾子引物的擴(kuò)增也出不來(lái)，我就搞不明白了，引物序列是一樣的，怎么這就結(jié)合不上去了��！ 大家快幫我分析分析吧~~~~或者給我推薦幾篇文獻(xiàn)也好！跪謝啊�。。�！ |
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6樓2013-03-27 17:01:37
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10樓2013-03-27 18:55:30
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