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zs416鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR小白，請教個關于NCBI的問題
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| PCR小白一枚，不會設計引物，想在NCBI上找個文章中的現(xiàn)成引物。已經(jīng)在NCBI上找到該基因了，但是，不知道怎么由基因的同源序列那里反過去查文章，請高手們教教我。 |
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意孤城_
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖應助！ 2013-05-31 16:54:20
gyesang: 回帖置頂 2013-05-31 16:54:37
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gyesang: 回帖置頂 2013-05-31 16:54:37
| 關于引物設計 很多人都選擇使用軟件什么的 那肯定會很好。從我們實驗室來講 從來不使用（除了一些特殊的PCR外）我們設計引物真的很隨意的 就在你的目的基因的上下游隨機取上18-20bp的序列（如果是從基因組上擴增就適當在長一點），有需要酶切位點的加上再加上保護堿基（有時候就達到近30bp），有的時候上下游退火溫度相差很大，使用梯度或者Touchdown很隨意就p出目的條帶了，百試不爽。當然可以注意一下3‘末端最后一個堿基避免T |
6樓2013-04-02 20:46:21
liyu0355
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2樓2013-03-30 18:53:37
zs416
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3樓2013-04-01 23:06:11
liyu0355
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4樓2013-04-02 10:50:40
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5樓2013-04-02 16:39:17
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