【答案】應(yīng)助回帖

» 猜你喜歡

求材料調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
085600材料與化工已經(jīng)有5人回復(fù)
085600材料與化工調(diào)劑 324分已經(jīng)有6人回復(fù)
286求調(diào)劑已經(jīng)有9人回復(fù)
焦慮已經(jīng)有12人回復(fù)
344求調(diào)劑已經(jīng)有6人回復(fù)
266求調(diào)劑已經(jīng)有9人回復(fù)
化學(xué)工程321分求調(diào)劑已經(jīng)有18人回復(fù)
314求調(diào)劑已經(jīng)有8人回復(fù)
08工科 320總分求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

LH-20葡聚糖凝膠柱的清洗已經(jīng)有11人回復(fù)
國(guó)產(chǎn)替代反相相關(guān)分離問(wèn)題已經(jīng)有10人回復(fù)
分子量相同，取代基位置不同的黃酮醇苷如何分離？已經(jīng)有12人回復(fù)
黃酮苷的分離求助��！已經(jīng)有7人回復(fù)
LH-20凝膠柱上樣的問(wèn)題已經(jīng)有14人回復(fù)
Sephadex LH20凝膠柱稍有流干，柱頭帶入氣泡，柱子還能用嗎？急！已經(jīng)有8人回復(fù)
大豆苷元等黃酮類物質(zhì)形成晶體？已經(jīng)有8人回復(fù)
【求助】銀杏總黃酮醇苷的計(jì)算已經(jīng)有4人回復(fù)
【求助】sephadxe-LH-20葡聚糖凝膠上柱分離時(shí)可以加壓?jiǎn)?/a> 已經(jīng)有19人回復(fù)

【求助】分單體的問(wèn)題已經(jīng)有17人回復(fù)
【求助】LH-20葡聚糖凝膠該如何裝柱子已經(jīng)有23人回復(fù)

我...明明努力了！

1樓 2013-03-31 17:22:46

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

tonypengt

木蟲(chóng) (正式寫手)

荒唐書(shū)生

PhEPI: 1
應(yīng)助: 5 (幼兒園)
金幣: 2084.7
散金: 50
紅花: 5
帖子: 607
在線: 187.7小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 860004
注冊(cè): 2009-09-29
性別: GG
專業(yè): 天然有機(jī)化學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
寶貝豬301: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-05-09 12:17:37

SephadexLH20是非常適合分離天然產(chǎn)物的一類凝膠產(chǎn)品，它在不同溶劑中有不同的溶脹系數(shù)。
能分離100-4000Da的化合物！
請(qǐng)問(wèn)樓主你用的是多大的柱子裝SephadexLH20？
我們實(shí)驗(yàn)室甲醇系統(tǒng)凝膠柱是裝在長(zhǎng)2米，直徑3.5厘米的玻璃柱中。
我用該柱分離過(guò)數(shù)量眾多的黃酮及黃酮苷類化合物，效果非常不錯(cuò)！
我估計(jì)樓主有兩方面的原因！一個(gè)是柱床不穩(wěn)定，也就是柱子沒(méi)裝好填料，凝膠柱不能像硅膠柱那樣隨便。
切記不能有氣泡和斷層。填料充分的溶劑系統(tǒng)泡脹后，以勻漿裝入玻璃柱中，待凝膠不再自然沉降時(shí)加入大量
溶劑系統(tǒng)進(jìn)行沖洗！使柱床壓實(shí)，最后上樣！
還有就是流速的問(wèn)題，依照我的使用經(jīng)驗(yàn)，分離黃酮及糖苷類化合物流速在10-15秒/滴，下午三四點(diǎn)種開(kāi)始上樣，第二天早上或者中午就可以拿到餾分！有沒(méi)有分開(kāi)在晚上就可以看見(jiàn)是否有多個(gè)黃色的色帶。

贊一下(2人)

荒唐

21樓2013-05-09 09:57:30

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lijinyu2011

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 7105.4
散金: 2
紅花: 2
帖子: 355
在線: 568.2小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1071683
注冊(cè): 2010-08-09
性別: MM
專業(yè): 天然藥物化學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
寶貝豬301: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-04-01 19:47:29
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:25

分離黃酮苷的過(guò)Sephadex LH-20，可以用純甲醇過(guò)柱，不能過(guò)的時(shí)間太長(zhǎng)，甲醇最后沖不下來(lái)，用70%左右丙酮水，快速?zèng)_下來(lái)，最后死吸附了，只能用酸堿再生柱子。另外還可以用氯仿：甲醇 1:1的系統(tǒng)。以上建議，僅供參考。

走在前面

6樓2013-04-01 15:29:28

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

huaqiangliu

新蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 66 (初中生)
金幣: 1124.3
紅花: 3
帖子: 144
在線: 84.9小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2289755
注冊(cè): 2013-02-20
專業(yè): 化學(xué)生物學(xué)與生物有機(jī)化學(xué)

只選有的，不選對(duì)的。只選貴的，不選對(duì)的。

14樓2013-04-03 10:19:53

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

寶貝豬301

木蟲(chóng) (正式寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2774.3
散金: 50
帖子: 358
在線: 295.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 988512
注冊(cè): 2010-04-03
性別: GG
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

引用回帖:

17樓: Originally posted by 787491498 at 2013-04-20 16:11:16
請(qǐng)問(wèn)您的徑高比是多少？上樣量又是多少？有沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)？...

我要分的幾種物質(zhì)的分子量相差不是特別大，所以現(xiàn)在放棄了凝膠，嘗試聚酰胺！

之前我請(qǐng)教過(guò)研博做天然產(chǎn)物的老師，他說(shuō)他讀博時(shí)分過(guò)黃酮苷。正丁醇相先過(guò)硅膠柱（柱子要粗，徑高比為1:3~1:5，加壓）斬?cái)�，再用聚酰胺去�?xì)分（聚酰胺是根據(jù)羥基吸附分離，效果好的話可以拿到比較純的單體），最后用凝膠亦或是反相去純化！

我不知道你分的是黃酮還是黃酮苷，如果你要分的東西水溶性不好，那么切記把柱子裝的太高，不然很容易結(jié)晶析出，洗都洗不下來(lái)。所以條件允許的話，最好加壓。

提醒一下，凝膠（分子篩）不能加壓的，不然會(huì)破壞結(jié)構(gòu)，凝膠就廢了。

我...明明努力了！

18樓2013-04-20 19:35:48

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

寶貝豬301

木蟲(chóng) (正式寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2774.3
散金: 50
帖子: 358
在線: 295.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 988512
注冊(cè): 2010-04-03
性別: GG
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

引用回帖:

17樓: Originally posted by 787491498 at 2013-04-20 16:11:16
請(qǐng)問(wèn)您的徑高比是多少？上樣量又是多少？有沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)？...

如果采用的是濕法上樣，建議先將樣品過(guò)濾下，以免把凝膠柱頭堵了，流速也就慢了...

至于你問(wèn)的徑高比，上樣量，不好意思，標(biāo)準(zhǔn)的話，我也不是太清楚，呵呵...

我...明明努力了！

19樓2013-04-20 19:39:24

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

yunnanyan

至尊木蟲(chóng) (文壇精英)

應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
金幣: 25032.4
紅花: 18
帖子: 13672
在線: 1177小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 324279
注冊(cè): 2007-03-15
性別: MM
專業(yè): 有機(jī)合成

沒(méi)做過(guò)，友情幫頂貼

2樓2013-03-31 20:32:16

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

wm0629

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)

應(yīng)助: 341 (大學(xué)生)
金幣: 6381.8
紅花: 3
帖子: 1962
在線: 77.9小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2217415
注冊(cè): 2013-01-01
性別: GG
專業(yè): 中藥炮制

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝 2013-04-01 09:50:25
寶貝豬301: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-01 10:34:57

實(shí)驗(yàn)室一般都用純甲醇作為流動(dòng)相，上完樣后在柱子上飽和4-6小時(shí)，然后用純甲醇洗脫，把流速開(kāi)到最大，柱子上的東西最好一天走完，這樣柱子就不會(huì)有吸附。一般走完柱子后柱頭會(huì)有變色的現(xiàn)象，不過(guò)沒(méi)關(guān)系，你可以把那部分扣出去，繼續(xù)上樣。以上建議，僅供參考。

艱難困苦，玉汝于成。

3樓2013-04-01 07:56:45

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

寶貝豬301

木蟲(chóng) (正式寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2774.3
散金: 50
帖子: 358
在線: 295.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 988512
注冊(cè): 2010-04-03
性別: GG
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

引用回帖:

3樓: Originally posted by wm0629 at 2013-04-01 07:56:45
實(shí)驗(yàn)室一般都用純甲醇作為流動(dòng)相，上完樣后在柱子上飽和4-6小時(shí)，然后用純甲醇洗脫，把流速開(kāi)到最大，柱子上的東西最好一天走完，這樣柱子就不會(huì)有吸附。一般走完柱子后柱頭會(huì)有變色的現(xiàn)象，不過(guò)沒(méi)關(guān)系，你可以把那 ...

請(qǐng)問(wèn)你們上的柱子是凝膠柱，還是普通的硅膠柱？

我上樣后僅飽和了十幾分鐘，會(huì)不會(huì)有影響？

流速會(huì)對(duì)分離效果有影響嗎？是不是說(shuō)柱子越高、流速越慢，分離效果就越好？

純甲醇洗脫后，柱子變黃；1%NaOH沖柱可以洗去吸附殘留的物質(zhì)。是否就說(shuō)明相對(duì)LH-20柱來(lái)說(shuō)，水的洗脫能力比純甲醇強(qiáng)

我...明明努力了！

4樓2013-04-01 10:34:31

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

huayu0428

新蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 66.9
帖子: 8
在線: 28.3小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 851137
注冊(cè): 2009-09-18
專業(yè): 藥理學(xué)其他科學(xué)問(wèn)題

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
寶貝豬301: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-04-01 19:46:22
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:21

可以嘗試用聚酰胺分離，效果很好，我用過(guò)

5樓2013-04-01 11:21:00

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

wm0629

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)

應(yīng)助: 341 (大學(xué)生)
金幣: 6381.8
紅花: 3
帖子: 1962
在線: 77.9小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2217415
注冊(cè): 2013-01-01
性別: GG
專業(yè): 中藥炮制

★
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:33

引用回帖:

4樓: Originally posted by 寶貝豬301 at 2013-04-01 10:34:31
請(qǐng)問(wèn)你們上的柱子是凝膠柱，還是普通的硅膠柱？

我上樣后僅飽和了十幾分鐘，會(huì)不會(huì)有影響？

流速會(huì)對(duì)分離效果有影響嗎？是不是說(shuō)柱子越高、流速越慢，分離效果就越好？

純甲醇洗脫后，柱子變黃；1%NaOH沖 ...

過(guò)的是凝膠柱SepdeLH-20，飽和時(shí)間有點(diǎn)短，可能都沒(méi)太吸附住就下來(lái)了。流速問(wèn)題沒(méi)研究過(guò)，一般都是全速流，柱子裝的別太高，這樣?xùn)|西下來(lái)的慢，而且容易死吸附。

艱難困苦，玉汝于成。

7樓2013-04-01 17:00:15

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

分離高手

新蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 81 (初中生)
金幣: 1405.7
紅花: 6
帖子: 187
在線: 111.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2323813
注冊(cè): 2013-03-06
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
寶貝豬301: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-01 20:28:20
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:37

LH-20分離物質(zhì)主要就是靠分子塞，兼有反向的作用，大家在看很多文獻(xiàn)中都會(huì)用到。但是分離效果如何其實(shí)有得的大部分還要加上制備，才能將物質(zhì)分開(kāi)來(lái)。比較容易污染，甲醇的洗脫能力肯定比甲醇水的洗脫能力強(qiáng)，如果實(shí)在洗不好就用異丙醇加堿洗一下，不過(guò)得快洗出來(lái)。不行洗不出來(lái)只能用作粗分離，要么扔了再買新的。也不是很貴25g就300塊左右，不過(guò)我覺(jué)得4樓說(shuō)的靠譜�？梢杂镁埘０吩囋嚒Ｆ鋵�(shí)分離黃酮苷還有其他很多方法，反向?qū)游鰳?shù)脂，反向硅膠，我們做牛蒡子甘元準(zhǔn)備一類新藥就是用的反向?qū)游鰳?shù)脂SKP-10-8300分的，純度能到99%。并不是堿水的洗脫能力強(qiáng)，是因?yàn)閴A把吸附的物質(zhì)分解掉或者反應(yīng)成鹽了吧。你的樣品最好經(jīng)過(guò)粗處理大孔樹(shù)脂聚酰胺氧化鋁什么的，再上精細(xì)分離的填料，別浪費(fèi)錢哦

8樓2013-04-01 20:18:27

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

快樂(lè)蟲(chóng)

金蟲(chóng) (小有名氣)

將軍

應(yīng)助: 9 (幼兒園)
金幣: 1470.9
散金: 7
帖子: 200
在線: 195.2小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 893362
注冊(cè): 2009-11-04
性別: GG
專業(yè): 中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
寶貝豬301: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-02 14:39:23
xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:41

甲醇的洗脫能力肯定比50%甲醇強(qiáng)，結(jié)合個(gè)人分黃酮的經(jīng)歷，認(rèn)為你的問(wèn)題有三點(diǎn)：1、柱子沒(méi)裝好，大分子物質(zhì)被阻礙向下走。2、上樣量太多。3、洗脫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，形成了死吸附。

不能忘記自己的夢(mèng)想

9樓2013-04-02 08:37:27

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

寶貝豬301

木蟲(chóng) (正式寫手)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2774.3
散金: 50
帖子: 358
在線: 295.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 988512
注冊(cè): 2010-04-03
性別: GG
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

引用回帖:

9樓: Originally posted by 快樂(lè)蟲(chóng) at 2013-04-02 08:37:27
甲醇的洗脫能力肯定比50%甲醇強(qiáng)，結(jié)合個(gè)人分黃酮的經(jīng)歷，認(rèn)為你的問(wèn)題有三點(diǎn)：1、柱子沒(méi)裝好，大分子物質(zhì)被阻礙向下走。2、上樣量太多。3、洗脫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，形成了死吸附。

確實(shí)如此，之前是因?yàn)橄疵摃r(shí)間過(guò)長(zhǎng)，造成了嚴(yán)重的死吸附！