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寶貝豬301木蟲 (正式寫手)
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[求助]
急�。�！黃酮苷過LH-20凝膠柱的相關問題！
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小弟需要分離純化幾種黃酮苷，這幾種黃酮苷掛有一個或兩個糖。 現(xiàn)有幾點疑問： 1、純甲醇和50%甲醇誰的洗脫能力強？ 2、選用什么洗脫劑最合適？ 3、之前用過50%甲醇洗脫，整個柱子都變黃了，僅僅洗脫下來部分物質。今天嘗試了純甲醇洗脫，柱頭3cm為白色，其余部分也是全部變黃，同樣僅僅洗脫下來部分物質。兩次均是大部分物質掛在柱子上洗不下來！有什么好的辦法么？！ 4、有沒有其它可以分離這種大極性黃酮苷的辦法？�。≒S：條件有限，沒辦法用制備）  望各位大神給予指導！  [ 來自科研家族 Natural Products家族 ] |
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SephadexLH20是非常適合分離天然產(chǎn)物的一類凝膠產(chǎn)品，它在不同溶劑中有不同的溶脹系數(shù)。 能分離100-4000Da的化合物！ 請問樓主你用的是多大的柱子裝SephadexLH20？ 我們實驗室甲醇系統(tǒng)凝膠柱是裝在長2米，直徑3.5厘米的玻璃柱中。 我用該柱分離過數(shù)量眾多的黃酮及黃酮苷類化合物，效果非常不錯！ 我估計樓主有兩方面的原因！一個是柱床不穩(wěn)定，也就是柱子沒裝好填料，凝膠柱不能像硅膠柱那樣隨便。 切記不能有氣泡和斷層。填料充分的溶劑系統(tǒng)泡脹后，以勻漿裝入玻璃柱中，待凝膠不再自然沉降時加入大量 溶劑系統(tǒng)進行沖洗！使柱床壓實，最后上樣！ 還有就是流速的問題，依照我的使用經(jīng)驗，分離黃酮及糖苷類化合物流速在10-15秒/滴，下午三四點種開始上樣，第二天早上或者中午就可以拿到餾分！有沒有分開在晚上就可以看見是否有多個黃色的色帶。 |
21樓2013-05-09 09:57:30
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xiaoxiao270: 金幣+1 2013-04-20 20:04:37
| LH-20分離物質主要就是靠分子塞，兼有反向的作用，大家在看很多文獻中都會用到。但是分離效果如何其實有得的大部分還要加上制備，才能將物質分開來。比較容易污染，甲醇的洗脫能力肯定比甲醇水的洗脫能力強，如果實在洗不好就用異丙醇加堿洗一下，不過得快洗出來。不行洗不出來只能用作粗分離，要么扔了再買新的。也不是很貴25g就300塊左右，不過我覺得4樓說的靠譜�？梢杂镁埘０吩囋嚒Ｆ鋵嵎蛛x黃酮苷還有其他很多方法，反向層析樹脂，反向硅膠，我們做牛蒡子甘元準備一類新藥就是用的反向層析樹脂SKP-10-8300分的，純度能到99%。并不是堿水的洗脫能力強，是因為堿把吸附的物質分解掉或者反應成鹽了吧。你的樣品最好經(jīng)過粗處理大孔樹脂 聚酰胺 氧化鋁什么的，再上精細分離的填料，別浪費錢哦 |
8樓2013-04-01 20:18:27
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10樓2013-04-02 14:40:14
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