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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 細胞周期問題
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細胞周期問題
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看了很多關(guān)于細胞周期的做法 我想請教各位 1、細胞消化要理想，資料顯示最好消化時加EDTA，可使流式做的很漂亮； 2、細胞消化后不可吹打過度，減少細胞破碎；以后的吹打也要注意，尤其是固定后的細胞容易破碎； 3、 細胞用PBS洗滌離心，轉(zhuǎn)速不超過1000r/min，有文獻用800r/min；可考慮在此過程中用300目的尼龍網(wǎng)過濾一遍細胞（有人主張用鋼網(wǎng)，以 減少細胞與尼龍網(wǎng)粘連的損失，本人認為鋼網(wǎng)易損傷細胞，DNA外溢也會造成細胞粘連，所以在細胞數(shù)足夠的情況下，首選尼龍網(wǎng)）； 4、離心后的固定，標準做法是將細胞懸液加入預冷70％酒精，而不是向細胞中加酒精，這樣是為了減少細胞聚集，這一點很重要，很多人都忽視了！ 第四步驟中的 細胞懸液用什么吹打成懸液的呢？？ 70％酒精還是啥呢？？？？ |
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