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糖小串銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
急求進(jìn)樣后HPLC柱壓升高的原因！！
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| 本人在做一個(gè)抗癌藥物的分析，發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣時(shí)進(jìn)一針，柱壓便升高1~2MPa,分析條件是：diol二醇基色譜柱（非新柱子）,流動(dòng)相乙腈：水=92：8，流速1ml/min,柱溫30度，情況是這樣，之前柱子是正用，分析了幾天后柱壓增加顯著，有些堵了，由于實(shí)驗(yàn)緊急，就先反過(guò)來(lái)用了。沖柱子的順序是進(jìn)樣前純乙腈--70%乙腈---流動(dòng)相（92%乙腈），反用后沖乙腈的柱壓是3.8mpa,沖70%乙腈是6.8mpa,92%乙腈是4.2.mpa,進(jìn)樣后的柱壓情況是 進(jìn)了一針柱壓變?yōu)?.2mpa,進(jìn)了兩針變?yōu)?.7mpa,進(jìn)了第三針就變成了10mpa，不敢進(jìn)了，怕柱子反用也廢掉。這是為什么呢？1我的樣品是過(guò)膜后稀釋的，并且用流動(dòng)相稀釋應(yīng)該也不會(huì)出現(xiàn)進(jìn)樣后晶體析出的現(xiàn)象，別人用這個(gè)機(jī)器的時(shí)候顯示正常，這是柱子自身的問(wèn)題呢？還是我的操作哪里有不對(duì)的地方？請(qǐng)各位前輩多多指教，不勝感激�。∵�想問(wèn)一下，如果反用了柱子還能再正用嗎？ |
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