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[交流]
[交流求助]CTAB法提DNA出現(xiàn)問題
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小生用CTAB法提植物葉片DNA，用乙醇沉淀DNA時，除了絮狀沉淀外，還出現(xiàn)大量碎末狀沉淀，不知道是什么東西？懇請各位大蝦不吝賜教。 提取液中氯化鈉的濃度為2M，以前1.4M時也有這種情況出現(xiàn)，不知道是不是鹽離子濃度太大的原因。 先謝謝各位了。 [search]提取DNA[/search] |
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2樓2007-09-21 07:50:52
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3樓2007-09-21 13:57:08
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4樓2007-09-23 15:41:26
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5樓2007-09-23 18:35:15
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johnsooh(金幣+1,VIP+0):thx
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我以前用1.4M時，還好，后來改成2M就出現(xiàn)這個問題了，我用乙醇沉淀DNA時，另外加了0.5倍體積5M的氯化鈉，出來的碎末狀沉淀很多，后來我用乙醇沉淀DNA時不加氯化鈉，出來了一點碎末狀沉淀，搖搖以后又溶解了，所以我認為這是典型的鹽析鹽溶現(xiàn)象，是鹽離子太多的緣故。 謝謝guohuayin，說得很有道理，我每次吸上清的時候都會將上清留點底。 最近我還碰到的問題是，提了半天，后來檢測只有RNA的條帶，邪門了。我不是個新手，以前從來沒遇到這種情況，現(xiàn)在是百思不得其解，大家?guī)兔Ψ治龇治霭ⅰ? |
6樓2007-09-23 21:39:01
yaya1712
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7樓2007-09-24 20:57:36
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這個我更是有體會呀 俺做了一個暑假的ctab 這就可能是提取材料的問題了 我提得是植物dna，我一開始提得還很順利的 可后來怎么也提不到dna了，只有rna，和降解的dna 我就找原因呀，派出了試劑，操作，槍頭剪切力，干燥等因素 最后我們新采了植物的葉子來對照，發(fā)現(xiàn)原來問題出在提取材料上呀 郁悶呀！ 還好終于找到原因了，可費了我們不少時間呀 所以以后誰要做提取，記得把材料分幾份保存，最好在-80溫度下保存 用時在拿出來，不然時間長了dna要降解的！ 和大家一起學習交流！ |
8樓2007-09-24 22:05:06
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