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[交流]
[交流求助]CTAB法提DNA出現(xiàn)問題
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小生用CTAB法提植物葉片DNA，用乙醇沉淀DNA時(shí)，除了絮狀沉淀外，還出現(xiàn)大量碎末狀沉淀，不知道是什么東西？懇請各位大蝦不吝賜教。 提取液中氯化鈉的濃度為2M，以前1.4M時(shí)也有這種情況出現(xiàn)，不知道是不是鹽離子濃度太大的原因。 先謝謝各位了。 [search]提取DNA[/search] |
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我覺得碎末狀沉淀是你沒有去除干凈的蛋白質(zhì)，在苯酚－氯仿重提階段，建議不要為了獲取大量的的DNA而將中間的那層吸出來，那層是蛋白質(zhì)，吸取上清液的時(shí)候，在最后快要吸完的時(shí)候，最好不要繼續(xù)吸出了，防止蛋白質(zhì)污染。 建議你用苯酚－氯仿抽提一次，再用氯仿：異戊醇抽提一次。 并且用70％的酒精多洗滌幾次，酒精洗滌的作用主要是去除鹽分。最后酒精洗滌完后，一定要晾干后再用適量的雙蒸水溶解或者TE緩沖液溶解。 |
5樓2007-09-23 18:35:15
2樓2007-09-21 07:50:52
runrunrun
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3樓2007-09-21 13:57:08
jjg0912
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4樓2007-09-23 15:41:26
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