 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1584 | 回復(fù): 9 | |||
| 當(dāng)前主題已經(jīng)存檔。 | |||
[交流]
[交流求助]CTAB法提DNA出現(xiàn)問(wèn)題
|
|||
|
小生用CTAB法提植物葉片DNA，用乙醇沉淀DNA時(shí)，除了絮狀沉淀外，還出現(xiàn)大量碎末狀沉淀，不知道是什么東西？懇請(qǐng)各位大蝦不吝賜教。 提取液中氯化鈉的濃度為2M，以前1.4M時(shí)也有這種情況出現(xiàn)，不知道是不是鹽離子濃度太大的原因。 先謝謝各位了。 [search]提取DNA[/search] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
材料專(zhuān)業(yè)求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專(zhuān)業(yè)（081702）315分求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
344求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
271材料工程求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料專(zhuān)碩英一數(shù)二306
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
294求調(diào)劑材料與化工專(zhuān)碩
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿中海洋材料工程專(zhuān)碩330分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留
已經(jīng)有9人回復(fù)
2樓2007-09-21 07:50:52
runrunrun
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1220.2
- 帖子: 524
- 在線(xiàn): 24.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 107071
- 注冊(cè): 2005-11-17
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
3樓2007-09-21 13:57:08
jjg0912
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 1882.8
- 紅花: 1
- 帖子: 367
- 在線(xiàn): 113.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 204504
- 注冊(cè): 2006-03-02
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物信息學(xué)
4樓2007-09-23 15:41:26
guohuayin
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
博士，副教授
- 應(yīng)助: 23 (小學(xué)生)
- 金幣: 3338.8
- 散金: 265
- 紅花: 17
- 帖子: 1521
- 在線(xiàn): 101.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 219355
- 注冊(cè): 2006-03-13
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 植物病理學(xué)
★ ★
johnsooh(金幣+1,VIP+0):thx
plantsoil(金幣+1,VIP+0):補(bǔ)充獎(jiǎng)勵(lì)
johnsooh(金幣+1,VIP+0):thx
plantsoil(金幣+1,VIP+0):補(bǔ)充獎(jiǎng)勵(lì)
|
我覺(jué)得碎末狀沉淀是你沒(méi)有去除干凈的蛋白質(zhì)，在苯酚－氯仿重提階段，建議不要為了獲取大量的的DNA而將中間的那層吸出來(lái)，那層是蛋白質(zhì)，吸取上清液的時(shí)候，在最后快要吸完的時(shí)候，最好不要繼續(xù)吸出了，防止蛋白質(zhì)污染。 建議你用苯酚－氯仿抽提一次，再用氯仿：異戊醇抽提一次。 并且用70％的酒精多洗滌幾次，酒精洗滌的作用主要是去除鹽分。最后酒精洗滌完后，一定要晾干后再用適量的雙蒸水溶解或者TE緩沖液溶解。 |
5樓2007-09-23 18:35:15
★
johnsooh(金幣+1,VIP+0):thx
johnsooh(金幣+1,VIP+0):thx
|
我以前用1.4M時(shí)，還好，后來(lái)改成2M就出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題了，我用乙醇沉淀DNA時(shí)，另外加了0.5倍體積5M的氯化鈉，出來(lái)的碎末狀沉淀很多，后來(lái)我用乙醇沉淀DNA時(shí)不加氯化鈉，出來(lái)了一點(diǎn)碎末狀沉淀，搖搖以后又溶解了，所以我認(rèn)為這是典型的鹽析鹽溶現(xiàn)象，是鹽離子太多的緣故。 謝謝guohuayin，說(shuō)得很有道理，我每次吸上清的時(shí)候都會(huì)將上清留點(diǎn)底。 最近我還碰到的問(wèn)題是，提了半天，后來(lái)檢測(cè)只有RNA的條帶，邪門(mén)了。我不是個(gè)新手，以前從來(lái)沒(méi)遇到這種情況，現(xiàn)在是百思不得其解，大家?guī)兔Ψ治龇治霭ⅰ? |
6樓2007-09-23 21:39:01
yaya1712
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 160
- 帖子: 97
- 在線(xiàn): 47分鐘
- 蟲(chóng)號(hào): 349426
- 注冊(cè): 2007-04-19
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 環(huán)境科學(xué)
7樓2007-09-24 20:57:36
shining-rose
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 829.5
- 帖子: 207
- 在線(xiàn): 34分鐘
- 蟲(chóng)號(hào): 434900
- 注冊(cè): 2007-08-19
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)與分子生物學(xué)
★ ★
johnsooh(金幣+1,VIP+0):多謝提供切身經(jīng)驗(yàn)
plantsoil(金幣+1,VIP+0):補(bǔ)充獎(jiǎng)勵(lì)
johnsooh(金幣+1,VIP+0):多謝提供切身經(jīng)驗(yàn)
plantsoil(金幣+1,VIP+0):補(bǔ)充獎(jiǎng)勵(lì)
這個(gè)我更是有體會(huì)呀 俺做了一個(gè)暑假的ctab 這就可能是提取材料的問(wèn)題了 我提得是植物dna，我一開(kāi)始提得還很順利的 可后來(lái)怎么也提不到dna了，只有rna，和降解的dna 我就找原因呀，派出了試劑，操作，槍頭剪切力，干燥等因素 最后我們新采了植物的葉子來(lái)對(duì)照，發(fā)現(xiàn)原來(lái)問(wèn)題出在提取材料上呀 郁悶呀！ 還好終于找到原因了，可費(fèi)了我們不少時(shí)間呀 所以以后誰(shuí)要做提取，記得把材料分幾份保存，最好在-80溫度下保存 用時(shí)在拿出來(lái)，不然時(shí)間長(zhǎng)了dna要降解的！ 和大家一起學(xué)習(xí)交流！ |
8樓2007-09-24 22:05:06
9樓2007-09-24 22:25:28
10樓2007-09-24 22:45:13
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 xuuue 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +7 | Liwangman 2026-03-15 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | S.H1 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿中國(guó)海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +4 | 1孫悟空 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +5 | 梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑（0805） +5 | 煙汐憶海 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | pupcoco 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 0854，計(jì)算機(jī)類(lèi)招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 本人考085602 化學(xué)工程 專(zhuān)碩 +16 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0856專(zhuān)碩279求調(diào)劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過(guò) 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | 李政瑩 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-12 | 4/200 |
|