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kallstrom木蟲 (小有名氣)
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[求助]
請問α-淀粉酶抑制劑的活性怎么測的?
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我看有產(chǎn)品規(guī)格書上寫3000 AAIU(α-淀粉酶抑制單位),這個是怎么測出來的? 各位前輩有知道的嗎? |
金蟲 (小有名氣)
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3000 AAIU:3000 alpha amylase inhibiting units α-淀粉酶抑制劑對不同病原真菌的抑制活性測定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 測定α-淀粉酶抑制劑對不同病原真菌的抑制活性,根據(jù)測定結(jié)果,可以用來研究以α-淀粉酶抑制劑為主要成分配置藥物治理作物病原真菌引起的病害。 二、實(shí)驗(yàn)原理 α-淀粉酶隨機(jī)的作用于淀粉的非還原端,最終生成可供生物體直接利用的葡萄糖,在接種有病原真菌的固體培養(yǎng)基上,加入α-淀粉酶抑制劑,可抑制真菌內(nèi)的淀粉酶活性,從而影響真菌的生長情況,最后通過測量并計算加入不同濃度抑制劑的培養(yǎng)基中的菌落的直徑與對照組的直徑的比值,可以得到抑制活性百分比。 三、實(shí)驗(yàn)材料、儀器、試劑 材料:水稻稻瘟菌、小麥條形柄銹菌、油菜菌核病菌懸液 試劑:新鮮馬鈴薯、蔗糖、瓊脂、自來水、α-淀粉酶抑制劑、 儀器:小鋁鍋、天平、1000ml刻度搪瓷量杯、菜板、小刀、牛角匙、玻璃棒、分裝漏斗、紗布、試管、棉花、電爐、三角瓶、平板培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌箱、接種環(huán)、恒溫箱 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、培養(yǎng)基的配制: (1)稱取去皮新鮮馬鈴薯200g切成1cm見方小塊放于小鋁鍋中,加1000ml自來水,置電爐上煮沸20min后,用雙層紗布過濾。濾液再倒入搪瓷杯中。 (2)稱取20g的蔗糖與瓊脂,以此加入搪瓷杯中,加熱攪拌至瓊脂完全融化,并補(bǔ)足水量至1000ml。 (3)趁熱分裝于5個250ml三角瓶中,每瓶200ml,塞好棉塞后用舊報紙將棉塞部分包扎好,貼好標(biāo)簽裝入小鐵絲筐。 (4)將12個培養(yǎng)皿、α-淀粉酶抑制劑、一瓶蒸餾水放入121℃高壓蒸汽滅菌30min。 2、接種培養(yǎng): (1)取滅菌的α-淀粉酶抑制劑、蒸餾水,制備稀釋10倍與100倍的α-淀粉酶抑制劑。 (2)取無菌平板培養(yǎng)皿12套,分成三組,向每個培養(yǎng)皿中倒入已滅菌的培養(yǎng)基液體,向每組分別加入1ml的無菌水、α-淀粉酶抑制劑、稀釋10倍的α-淀粉酶抑制劑、稀釋100倍的α-淀粉酶抑制劑,立即輕輕地在臺面上沿一個方向搖動,混合均勻,并用記號筆在皿底標(biāo)記1、2、3、4號。 (3)待培養(yǎng)基凝固后,用接種環(huán)蘸取菌懸液接種三種細(xì)菌分別接種到三組培養(yǎng)皿中,蓋上皿蓋,放置20min,再用報紙包好,放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)10天。 3、觀察結(jié)果: 從恒溫箱中取出培養(yǎng)基,觀察菌落生長情況,測量每個培養(yǎng)皿中的菌落直徑,并計算每個培養(yǎng)皿中菌落的平均直徑,記錄數(shù)據(jù)。 五、原始數(shù)據(jù)記錄 無菌水 抑制劑 稀釋10倍的抑制劑 稀釋100倍的抑制劑 水稻稻瘟菌 小麥條形柄銹菌 油菜菌核病菌 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析 α-淀粉酶抑制劑抑制活性=1-實(shí)驗(yàn)組菌落直徑/對照組菌落直徑*100% |

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