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kallstrom木蟲 (小有名氣)
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[求助]
請問α-淀粉酶抑制劑的活性怎么測的？
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我看有產(chǎn)品規(guī)格書上寫3000 AAIU（α-淀粉酶抑制單位），這個是怎么測出來的？ 各位前輩有知道的嗎？ |
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wanglian63
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
癡夷子皮: 金幣+5, 3Q ,歡迎常來哦。 2013-04-23 08:24:07
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3000 AAIU:3000 alpha amylase inhibiting units α-淀粉酶抑制劑對不同病原真菌的抑制活性測定 一、實驗?zāi)康?br /> 測定α-淀粉酶抑制劑對不同病原真菌的抑制活性，根據(jù)測定結(jié)果，可以用來研究以α-淀粉酶抑制劑為主要成分配置藥物治理作物病原真菌引起的病害。 二、實驗原理 α-淀粉酶隨機的作用于淀粉的非還原端，最終生成可供生物體直接利用的葡萄糖，在接種有病原真菌的固體培養(yǎng)基上，加入α-淀粉酶抑制劑，可抑制真菌內(nèi)的淀粉酶活性，從而影響真菌的生長情況，最后通過測量并計算加入不同濃度抑制劑的培養(yǎng)基中的菌落的直徑與對照組的直徑的比值，可以得到抑制活性百分比。 三、實驗材料、儀器、試劑 材料：水稻稻瘟菌、小麥條形柄銹菌、油菜菌核病菌懸液 試劑：新鮮馬鈴薯、蔗糖、瓊脂、自來水、α-淀粉酶抑制劑、 儀器：小鋁鍋、天平、1000ml刻度搪瓷量杯、菜板、小刀、牛角匙、玻璃棒、分裝漏斗、紗布、試管、棉花、電爐、三角瓶、平板培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌箱、接種環(huán)、恒溫箱 四、實驗步驟 1、培養(yǎng)基的配制： （1）稱取去皮新鮮馬鈴薯200g切成1cm見方小塊放于小鋁鍋中，加1000ml自來水，置電爐上煮沸20min后，用雙層紗布過濾。濾液再倒入搪瓷杯中。 （2）稱取20g的蔗糖與瓊脂，以此加入搪瓷杯中，加熱攪拌至瓊脂完全融化，并補足水量至1000ml。 （3）趁熱分裝于5個250ml三角瓶中，每瓶200ml，塞好棉塞后用舊報紙將棉塞部分包扎好，貼好標(biāo)簽裝入小鐵絲筐。 （4）將12個培養(yǎng)皿、α-淀粉酶抑制劑、一瓶蒸餾水放入121℃高壓蒸汽滅菌30min。 2、接種培養(yǎng)： （1）取滅菌的α-淀粉酶抑制劑、蒸餾水，制備稀釋10倍與100倍的α-淀粉酶抑制劑。 （2）取無菌平板培養(yǎng)皿12套，分成三組，向每個培養(yǎng)皿中倒入已滅菌的培養(yǎng)基液體，向每組分別加入1ml的無菌水、α-淀粉酶抑制劑、稀釋10倍的α-淀粉酶抑制劑、稀釋100倍的α-淀粉酶抑制劑，立即輕輕地在臺面上沿一個方向搖動，混合均勻，并用記號筆在皿底標(biāo)記1、2、3、4號。 （3）待培養(yǎng)基凝固后，用接種環(huán)蘸取菌懸液接種三種細菌分別接種到三組培養(yǎng)皿中，蓋上皿蓋，放置20min，再用報紙包好，放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)10天。 3、觀察結(jié)果： 從恒溫箱中取出培養(yǎng)基，觀察菌落生長情況，測量每個培養(yǎng)皿中的菌落直徑，并計算每個培養(yǎng)皿中菌落的平均直徑，記錄數(shù)據(jù)。 五、原始數(shù)據(jù)記錄 無菌水 抑制劑 稀釋10倍的抑制劑 稀釋100倍的抑制劑 水稻稻瘟菌 小麥條形柄銹菌 油菜菌核病菌 六、實驗結(jié)果及分析 α-淀粉酶抑制劑抑制活性=1-實驗組菌落直徑/對照組菌落直徑*100% |
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2013-04-22 13:33:30, 28 K
2樓2013-04-22 13:40:33
kallstrom
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6樓2016-01-15 10:53:26
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