 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2092 | 回復(fù): 8 | ||||
[求助]
求助：為什么Ni柱再生后純化蛋白無活性~~~
|
| 我做了兩次純化，第一次用的是一個舊柱子，上柱后用梯度洗脫液洗脫，檢測每個梯度洗下的酶都是有活性的。后來把柱子再生了一下，誘導(dǎo)表達后破碎菌體，將破碎上清檢測了一下也是有活性的，但是上柱純化透析復(fù)性之后就沒活性了，這樣看是柱子再生的問題嗎？ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白質(zhì)生物學(xué)實驗經(jīng)驗 | 核酸生物學(xué)實驗經(jīng)驗 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有187人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 鎳柱純化中再生后柱子變白，什么問題？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 蛋白質(zhì)的Ni柱純化問題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 求助！關(guān)于GST融合蛋白純化！樓主愁得一夜沒有睡好！
已經(jīng)有20人回復(fù)
- Ni-NTA純化蛋白
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 關(guān)于鎳柱純化蛋白
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 純化出的蛋白沒有活性，求教！
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 求助蛋白純化的高手
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于Ni-NTA純化蛋白
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】his標簽蛋白純化
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么鎳柱純化可溶性蛋白，電泳結(jié)果總是顯示不純呢？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】鎳柱純化的蛋白保存在-20度一個星期，拿出來都是沉淀？？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】如何高度純化蛋白，急急急
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
- 【求助/交流】有關(guān)蛋白純化及其基因克隆的問題！請大家?guī)椭?/a>
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】SP柱子純化蛋白，蛋白結(jié)合后，用2M NacL都沒有洗脫下來，該怎么辦？
已經(jīng)有5人回復(fù)
zhaolf
木蟲 (著名寫手)
胖虎愛唱歌
- 應(yīng)助: 37 (小學(xué)生)
- 金幣: 3356.7
- 紅花: 10
- 帖子: 1689
- 在線: 478.3小時
- 蟲號: 1872406
- 注冊: 2012-06-29
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 錯別字不少哇菇?jīng)龉�。贈人玫瑰手有余�?2013-04-22 15:40:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 錯別字不少哇菇?jīng)龉�。贈人玫瑰手有余�?2013-04-22 15:40:15
|
應(yīng)該和再生沒什么關(guān)系,除非你操作不當. 不過透析復(fù)性是什么意思?難道你用的變性純化? 如果不是變形純化, 說明很可能你的酶在高鹽下,或者一定的pH時才有活性,因為你提到的有活性的情況全是高鹽,或者purification buffer pH狀態(tài)下的,而透析后(一般偷襲是為了除鹽,且可能改變pH, 取決于你的dialysis buffer是什么),鹽濃度降低,或者pH變化等,活性就沒了.如果是這樣,你這算是個意外的大發(fā)現(xiàn) |
2樓2013-04-22 13:57:45
3樓2013-04-22 16:50:02
4樓2013-04-23 14:20:17
renzhiq
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 56 (初中生)
- 金幣: 2106.1
- 紅花: 9
- 帖子: 298
- 在線: 53.3小時
- 蟲號: 1949303
- 注冊: 2012-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
5樓2013-05-01 10:29:30
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
6樓2013-08-07 10:59:48
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
7樓2013-08-07 11:05:06
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
8樓2013-08-07 11:08:27
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗: +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時
- 蟲號: 1766465
- 注冊: 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
9樓2013-08-07 11:13:14
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 巢北 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求老師收我 +3 | zzh16938784 2026-03-23 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +6 | 87639 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +3 | α____ 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑一志愿211 +3 | 上岸6666@ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 305分求調(diào)劑（食品工程） +4 | Sxy112 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)071000，求調(diào)劑 +4 | 沿岸有貝殼6 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +10 | Faune 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | shxchem 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0805材料320求調(diào)劑 +3 | 深海物語 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑0854 +3 | assdll 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601調(diào)劑 358分 +3 | zzzzggh 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學(xué)-071000生物學(xué)-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù)
 10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +7 | 為學(xué)666 2026-03-16 | 7/350 |
|