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PCR產(chǎn)物無(wú)條帶？
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我做DNA電泳有條帶（見圖），但PCR產(chǎn)物電泳不有條帶，找不到原因，求救。 30UL體系：Taq buffer(Mg2+) 3ul dNTPs (2.5mM) 2.4ul 上游引物(20um/L) 1.2ul 下游引物 (20um/L) 1.2ul ddH2O 22.1ul Taq 酶 0.3U DNA 模版 1.2ul Z4 B1-G3 2013-04-24 20 小時(shí) 53 分鐘.jpg |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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P不出條帶原因很多啊，不用著急一個(gè)一個(gè)排除。你用的酶、BUFFER、水都是實(shí)驗(yàn)室共用的，別人能做出來(lái)證明這些沒有問題。 身下就是模板、引物與程序了，引物是你自己設(shè)計(jì)的么？特異性如何？確定引物沒有講解掉或者你稀釋的時(shí)候有沒有問題。 模板從圖上看沒有問題，你可以稀釋一下模板，做一個(gè)退火溫度梯度，先試一試吧。 |
9樓2013-04-25 11:08:40
10樓2013-04-25 16:18:34
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