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[求助]
關(guān)于稀釋平板計數(shù)法的疑問
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1.我用的澆注法，應(yīng)該24h計數(shù)還是48h計數(shù)？ 2.長了24h后培養(yǎng)基表面的菌落很明顯，但是培養(yǎng)基內(nèi)部的菌就是一個小點點，很難看到，稀釋倍數(shù)低的平板像是10倍100倍1000倍幾乎全部都是一個點一個點大片大片的挺均勻根本看不清。這時該怎么計數(shù)呢？稀釋度高的培養(yǎng)基內(nèi)部也有一些點點，是表面和內(nèi)部的都記上去嗎？ 3.我一共做了7個梯度的十倍稀釋。原菌液倒平板之前的OD是1.13了，稀釋十倍之后變成0.13，稀釋100倍是0.01，1000居然變成0了，后面的稀釋度也是0左右。那這么看來菌液里的菌很少很少很少了，可是為什么平板計數(shù)后后面OD值是0的菌長出來的菌落還挺多啊，不數(shù)那些點點就差不多在30-300之間，數(shù)了差不多1000以上了。。。。 不懂怎么計數(shù)。我是想做一個CFU與OD之間關(guān)系的曲線來著。 是不是該等平板培養(yǎng)一段時間的同時要將相應(yīng)稀釋倍數(shù)的菌同等條件培養(yǎng)呢？是不是菌在平板里擴大培養(yǎng)了所以之前測的OD值是不對的？ [ Last edited by 襄陽蓉兒 on 2013-4-28 at 11:46 ] |
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4樓2013-04-28 19:40:30
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關(guān)于第一個問題，24小時應(yīng)該就可以了，時間太長菌落數(shù)就難以確定了，后期就都長在一起了，而且后期也有抑制作用了 第二個問題其實都做幾個平行試驗就可以了，不用計數(shù)稀釋度低的吧，只要把稀釋到最后的菌落數(shù)合適的那個梯度多做幾個平行試驗不就可以倒推回原菌落數(shù)嗎 第三個問題可能你的操作不當，在空氣中就染菌了，是在酒精燈范圍內(nèi)操作的嗎？應(yīng)在酒精的火焰周圍15厘米的范圍內(nèi)操作才可以保證不染菌。 希望能幫到你啊 |
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5樓2013-04-28 19:55:03
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