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小兵仔新蟲 (初入文壇)
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小鼠B16黑素瘤細(xì)胞的培養(yǎng)問題
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| 大家好，我培養(yǎng)的小鼠B16黑素瘤細(xì)胞在傳到第四代時(shí)培養(yǎng)液出現(xiàn)渾濁，并且細(xì)胞出現(xiàn)死亡和細(xì)胞融合。請(qǐng)問是這什么原因？污染了會(huì)不會(huì)引起上述現(xiàn)象？ |
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fionaliu1982
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
小兵仔: 金幣+5, ★★★很有幫助, 有可能是衰老的原因。 2013-05-05 11:39:49
小兵仔: 金幣+5, ★★★很有幫助, 有可能是衰老的原因。 2013-05-05 11:39:49
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讀研時(shí)我也養(yǎng)過三年B16細(xì)胞，總體來說還是比較好養(yǎng)的。出現(xiàn)死亡等異常情況的原因很多，不一定是污染，也有可能是你的細(xì)胞株本身已經(jīng)老化了。你可以嘗試一下以下做法：①換培養(yǎng)液時(shí)留一半原液，換一半液；②換用更好的胎牛血清。另外，需要注意的是：傳代的時(shí)機(jī)要把握好，還有酶消化時(shí)不要過頭。這都是導(dǎo)致?lián)p傷老化的原因。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2013-05-04 23:31:12
小兵仔
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你好，謝謝你的幫助，你養(yǎng)了3年的B16應(yīng)該是很有經(jīng)驗(yàn)的。我是才開始養(yǎng)B16的，我還是有些問題不是很明白，想請(qǐng)教你，請(qǐng)幫幫忙了，呵呵呵謝謝。我從細(xì)胞庫買來細(xì)胞就開始養(yǎng)。說明書上說3天傳一代，結(jié)果長(zhǎng)的太好了養(yǎng)了半天就鋪滿了，（怎么細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的這么快啊？）就開始凍存和傳代。第二代和第三代長(zhǎng)勢(shì)都很快，但是隨著代數(shù)的增加培養(yǎng)周期也開始延長(zhǎng)了，（這是什么原因��？）期間培養(yǎng)液也是渾濁的，當(dāng)培養(yǎng)液很渾濁時(shí)我換過培養(yǎng)液（這個(gè)操作應(yīng)該不會(huì)有影響吧？）。但是到了第四代觀察細(xì)胞的時(shí)候就發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁并且有黑色的小點(diǎn)，而且小黑點(diǎn)還有簇狀的單個(gè)的還會(huì)動(dòng)，有的高速旋轉(zhuǎn)（這個(gè)應(yīng)該是屬于污染了吧？）。倒掉污染這幾瓶細(xì)胞后我又復(fù)蘇了一管第二代凍存的細(xì)胞培養(yǎng)，剛開始都是好好的，換過幾次培養(yǎng)液后培養(yǎng)液中又出現(xiàn)小黑點(diǎn)了（凍存的第二代應(yīng)該沒有污染）。 還有請(qǐng)教一下，我用的是試劑公司生產(chǎn)的袋裝的培養(yǎng)干粉，這應(yīng)該是屬于高糖的吧？袋裝的干粉配方也沒有標(biāo)注的。我見培養(yǎng)條件是要高糖的培養(yǎng)基。 請(qǐng)幫我解答一下，非常感謝。。。 |
3樓2013-05-05 12:21:16
fionaliu1982
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4樓2013-05-06 16:11:16
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呵呵呵。 5樓2013-05-06 23:24:35
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7樓2014-07-26 22:32:14
蘑菇找?椫?/a>
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8樓2015-03-28 10:38:18
9樓2018-12-12 19:10:01
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