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[求助]
小鼠B16黑素瘤細胞的培養(yǎng)問題
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| 大家好，我培養(yǎng)的小鼠B16黑素瘤細胞在傳到第四代時培養(yǎng)液出現(xiàn)渾濁，并且細胞出現(xiàn)死亡和細胞融合。請問是這什么原因？污染了會不會引起上述現(xiàn)象？ |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
小兵仔: 金幣+5, ★★★很有幫助, 有可能是衰老的原因。 2013-05-05 11:39:49
小兵仔: 金幣+5, ★★★很有幫助, 有可能是衰老的原因。 2013-05-05 11:39:49
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讀研時我也養(yǎng)過三年B16細胞，總體來說還是比較好養(yǎng)的。出現(xiàn)死亡等異常情況的原因很多，不一定是污染，也有可能是你的細胞株本身已經(jīng)老化了。你可以嘗試一下以下做法：①換培養(yǎng)液時留一半原液，換一半液；②換用更好的胎牛血清。另外，需要注意的是：傳代的時機要把握好，還有酶消化時不要過頭。這都是導致?lián)p傷老化的原因。 [ 發(fā)自手機版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2013-05-04 23:31:12
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你好，謝謝你的幫助，你養(yǎng)了3年的B16應該是很有經(jīng)驗的。我是才開始養(yǎng)B16的，我還是有些問題不是很明白，想請教你，請幫幫忙了，呵呵呵謝謝。我從細胞庫買來細胞就開始養(yǎng)。說明書上說3天傳一代，結果長的太好了養(yǎng)了半天就鋪滿了，（怎么細胞會長的這么快��？）就開始凍存和傳代。第二代和第三代長勢都很快，但是隨著代數(shù)的增加培養(yǎng)周期也開始延長了，（這是什么原因��？）期間培養(yǎng)液也是渾濁的，當培養(yǎng)液很渾濁時我換過培養(yǎng)液（這個操作應該不會有影響吧？）。但是到了第四代觀察細胞的時候就發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁并且有黑色的小點，而且小黑點還有簇狀的單個的還會動，有的高速旋轉（這個應該是屬于污染了吧？）。倒掉污染這幾瓶細胞后我又復蘇了一管第二代凍存的細胞培養(yǎng)，剛開始都是好好的，換過幾次培養(yǎng)液后培養(yǎng)液中又出現(xiàn)小黑點了（凍存的第二代應該沒有污染）。 還有請教一下，我用的是試劑公司生產(chǎn)的袋裝的培養(yǎng)干粉，這應該是屬于高糖的吧？袋裝的干粉配方也沒有標注的。我見培養(yǎng)條件是要高糖的培養(yǎng)基。 請幫我解答一下，非常感謝。。。 |
3樓2013-05-05 12:21:16
4樓2013-05-06 16:11:16
呵呵呵。 5樓2013-05-06 23:24:35
6樓2014-02-21 16:00:00
7樓2014-07-26 22:32:14
8樓2015-03-28 10:38:18
9樓2018-12-12 19:10:01
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