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zhuqinjian金蟲 (小有名氣)
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[求助]
SaII和BamHI雙酶切切不開
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| 我用T載體與目的片段連接后,導(dǎo)入JM109中,用菌落PCR也能P出目的片段,提取質(zhì)粒后PCR也能P出來,電泳跑出來的片段也正確(環(huán)狀片段跑出來有3條帶),但是用SaII和BamHI雙酶切就是切不出來,只有一條帶。求大神指導(dǎo)?是不是只是單酶切了啊?為啥雙酶切切不出來呢? |

木蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
銅蟲 (小有名氣)
| 酶切之前,樣品質(zhì)粒要進(jìn)行除酶,除鹽,除乙醇等處理。一般就是酚氯仿抽提,技術(shù)要過關(guān),不要在后面醇沉?xí)r留下太多的乙醇。上面說的單酶切驗(yàn)證酶是否失效是可行的,但是樣品必須干凈。內(nèi)切酶很受離子和乙醇等物質(zhì)影響的。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[基金申請(qǐng)]
有必要更換申報(bào)口嗎
20+3
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