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[交流]
GUS染色染不上的原因 已有2人參與
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| 我用基因槍做瞬時(shí)表達(dá)分析，一共構(gòu)建了14個(gè)表達(dá)載體，報(bào)告基因是GUS，轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌之后，用質(zhì)粒打基因槍?zhuān)牧鲜菧厥矣衩椎募s2.5mm的胚。第一次打槍后用GUS染液染色，都有藍(lán)色，而且很明顯。隔了三個(gè)月之后，又做一次平行（一切實(shí)驗(yàn)條件和用具都一樣），材料還是溫室玉米的約2.5mm的胚。結(jié)果染色特別淺，而且有的沒(méi)染上色。請(qǐng)高手解答一下，這是什么原因造成的？GUS染液應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題的 |
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5樓2013-05-13 17:57:51
cjzyfx
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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- 專(zhuān)業(yè): 作物分子育種
2樓2013-05-13 14:49:39
3樓2013-05-13 17:21:50
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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首先，質(zhì)粒就是質(zhì)粒，沒(méi)有什么農(nóng)桿菌，大腸桿菌質(zhì)粒的 一開(kāi)始我以為你是用農(nóng)桿菌侵染的，所以農(nóng)桿菌狀態(tài)可排除，每一批胚盡管都是2.5mm的，但是可能它的狀態(tài)會(huì)差別很大，還有染色液，同樣的染色液，染不同批次的東西結(jié)果也會(huì)有差別，跟材料的狀態(tài)，環(huán)境的變化都有關(guān)系，再者，你這屬于瞬時(shí)表達(dá)，結(jié)果重復(fù)性很差，也正常 |
4樓2013-05-13 17:36:07
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