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325865959銅蟲 (初入文壇)
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求助：哪些類蛋白在大腸桿菌中不好表達(dá)？
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| 哪些類蛋白在大腸桿菌中，即使不長(zhǎng)，表達(dá)載體正常，優(yōu)化密碼子后仍然不好表達(dá)？都有哪些原因？ |
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peng5053
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文獻(xiàn)找不到了 數(shù)據(jù)應(yīng)該來(lái)自這個(gè)中心 http://www.secsg.org/cgi-bin/report.pl |
5樓2013-05-15 17:27:03
不轉(zhuǎn)錄的DNA
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6樓2013-05-15 18:30:07
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8樓2013-05-16 10:39:51
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9樓2013-05-16 11:04:39
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額，如果稀有密碼子的話，換個(gè)稀有密碼子菌株就好了。如果有毒的話，試試表達(dá)毒性蛋白的菌株。 作為公司，不會(huì)采用這么成本高的方法的 個(gè)人覺(jué)得，除了個(gè)別蛋白，更有效的方法應(yīng)該換不同的標(biāo)簽或者載體就好了。 Nus，MBP,GST,TRX…… pET,pQE,pBAD,pTric…… rosetta,PLYSE,C43…… 有時(shí)候也不見得不表達(dá)，可能量太少SDS看不到，或者位置偏離的較遠(yuǎn)被忽略了。 先加個(gè)His，用抗體看看情況吧。除非有文獻(xiàn)明確指出是基因序列的問(wèn)題。 |
10樓2013-05-16 13:10:14
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